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- 愚公生物 / NEB / Takara
- EG15205S / M0202V / 2011A
- 2026年07月09日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
充足
- 规格：
100 U/μL，500 U（5 μL）
T4 DNA Ligase
产品货号（型号）：EG15205S（愚公生物） / M0202V（NEB） / 2011A（Takara）
产品规格：100 U/μL，500 U（5 μL）；含1× T4 DNA Ligase Buffer（含ATP、DTT、Mg²⁺等优化组分）
核心优势：
- 高活性：≥100 U/μL，高效连接粘性末端、平末端及单碱基突出末端
- 热敏型：65℃ 10 min 可完全失活，便于下游酶切或PCR等操作
- 宽兼容性：适配多种缓冲体系（如NEB T4 DNA Ligase Buffer、Takara Ligation Solution、愚公配套Buffer），支持室温（16℃过夜或25℃快速连接）
- 高纯度：经多步亲和纯化，核酸酶（RNase A、DNase）、蛋白酶残留极低，保障连接保真性
- 即用型配方：部分货号（如EG15205S、M0202V）预混稳定剂，-20℃长期保存活性无衰减
同系列产品：
- EG15205M（愚公，2,500 U）
- M0202L（NEB，2,000 U）
- 2011B（Takara，2,000 U）
- EG15206S（愚公，T4 DNA Ligase with Rapid Ligation Buffer，500 U）
- M0202S（NEB，High-Concentration T4 DNA Ligase，2,000 U @ 400 U/μL）
FAQ：
- Q：T4 DNA Ligase 是否可连接双链DNA中的缺口（nick）？
A：可以，但效率显著低于双链断裂（DSB）连接；推荐使用DNA Polymerase I（Klenow片段）+ T4 DNA Ligase协同修复。 - Q：平末端连接为何需要更高酶量和更长孵育时间？
A：平末端缺乏互补氢键稳定，需更高浓度酶与ATP维持有效碰撞与腺苷酰化中间体形成，通常建议16℃过夜或25℃ 30–60 min。 - Q：能否在PCR产物直接连接中省略纯化步骤？
A：不推荐。PCR体系中残留的dNTPs、引物、聚合酶及盐分会竞争性抑制T4 DNA Ligase活性并降低连接效率；建议柱纯化或磁珠法纯化后连接。 - Q：不同品牌T4 DNA Ligase Buffer是否通用？
A：基本兼容，但ATP浓度与稳定剂配方存在差异；建议优先使用对应品牌原装Buffer。若混用，请验证连接效率（尤其对平末端或低浓度插入片段）。 - Q：如何判断连接反应是否成功？
A：可通过琼脂糖凝胶电泳观察条带迁移变化（如载体+插入片段→连接产物分子量增大）、转化后菌落PCR筛选、或测序验证连接位点保真性。
注：各品牌实际成分与储存条件请以实物标签为准；愚公生物EG15205S为国产高性价比替代方案，性能对标NEB M0202V与Takara 2011A。
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文献和实验Ligation of DNA with T4 DNA Ligase
recombination and DNA synthesis. DNA ligase from E. coli is a polypeptide with a molecular weight of 74,000 and is NAD-dependent. T4 DNA ligase is the product of gene 30 of the T4 phage, has a molecular weight of 68,000, and is ATP-dependent. Both enzymes
Joining RNA Molecules with T4 DNA Ligase
Researchers interested in studying RNA structure and function or RNA-protein interactions are increasingly using site-specifically modified RNAs to probe sites of interest (1 ). In addition to expanding the repertoire of functional groups
Splint Ligation of RNA with T4 DNA Ligase
Splint ligation of RNA, whereby specific RNA molecules are ligated together, can be carried out using T4 DNA ligase and a bridging DNA oligonucleotide complementary to the RNAs. This method takes advantage of the property of T4 DNA ligase
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