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充足
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10,000 U/支
EcorI限制性内切酶
产品货号(型号):1040
产品规格:10,000 U/支
核心优势:
• 高纯度、高活性,经严格质控确保批次间稳定性;
• 识别序列:5′-GAATTC-3′,产生5′突出末端(4 bp);
• 兼容Takara标准缓冲液(Buffer EcoR I),37℃反应,兼容多种DNA模板(质粒、PCR产物、基因组DNA);
• 无非特异性核酸酶(DNase/RNase)及蛋白酶污染,保障下游应用(克隆、测序、连接等)可靠性;
• 提供甘油-free冻干粉及液体两种形式(本货号为液体形式,含50%甘油,-20℃保存)。
同系列产品:
• HindIII(货号:1050)
• BamHI(货号:1060)
• XbaI(货号:1070)
• SalI(货号:1080)
• PstI(货号:1090)
FAQ:
1. EcoRI是否需要热失活?
无需常规热失活;若需终止反应,可加入EDTA至终浓度10 mM或使用酚/氯仿抽提。
2. 该酶在哪些缓冲体系中活性最佳?
推荐使用Takara Buffer EcoR I(10×),含50 mM Tris-HCl (pH 7.5), 100 mM NaCl, 10 mM MgCl₂, 1 mM DTT。
3. 能否用于甲基化DNA的切割?
不能切割Dam甲基化(GmATC)或Dcm甲基化(CCmAGG)位点,但对CpG甲基化不敏感。
4. 单位定义是什么?
1 U指37℃、60 min内完全消化1 μg λ DNA所需的酶量。
5. 储存条件与稳定性如何?
-20℃避光保存;反复冻融≤5次;液体形式含甘油,-20℃下稳定保存12个月。
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文献和实验相关专题 限制性核酸内切酶产品选择专题 一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶 称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindII、HindIII,HpaI、HpaII,MboI、MboI等。 限制性内切酶(restriction
与分子量的对数成反比。要准确地确定DNA片段的大小,必须用分子量标准物同时进行电泳对照。常用的分子量标准是lDNA/EcoRI、lDNA/HindIII、lDNA/EcoRI+HindIII的酶切片段 实验材料和试剂 (一)实验材料 实验二提取的质粒 pUC118 (二)试剂 1.限制性内切酶 BamHI 2.l DNA/HindIII分子量标准 3.双蒸馏无菌水
; 重组pBS 质料或pUC19 质粒; EcoRI 酶及其酶切缓冲液; HindⅢ酶及其酶切缓冲液;琼脂糖(Agarose)。 [实验步骤] 1.将清洁干燥并经灭菌的eppendorf 管(最好0.5ml)编号,用微量移液枪分别加入DNA1μg 和相应的限制性内切酶反应10×缓冲液2μl,再加入重蒸水使总体积为19μl,将管内溶液混匀后加入1μl 酶液,用手指轻弹管壁使溶液混匀,也可用微量离心机甩一 下,使溶液集中在管底。 2. 混匀反应
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