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- HL1125
- 2026年07月08日
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英文名称：Liquid Sabouraud Medium
规格：250g
沙氏液体培养基产品说明与用途：用于真菌、酵母菌增菌
沙氏液体培养基使用操作规程：
目的：建立营养琼脂培养基配制使用操作规程。
范围：本操作规程适用于营养琼产品脂培养基的配制使用。
职责：质检室质检员负责本操作规程的执行，质保室质监员负责本操作规程的监督检查。
本文由沙氏液体培养基生产厂家上海哈灵生物科技有限公司提供 www.sh-haling.com
沙氏液体培养基实验内容：
1．仪器与试剂：
1.1.托盘天平、消毒锅、电实验冰箱、1000ml三角瓶、500ml量筒、玻璃棒、棉塞、牛皮纸、线绳、培养皿。
1.2.蒸馏水、营养琼脂、75%酒精。
2.操作方法
2.1.称取营养琼脂17克，于1000ml三角瓶内，加入500ml纯化水，充分搅拌后，塞上棉塞，用牛皮纸包好，扎紧瓶口。
2.2.置消毒锅内，于115℃高压灭菌30分钟，取出放置至室温后，放入实验冰箱，备用（实验冰箱温度控制在1－4℃）。
2.3.使用时从实验冰箱取出，放置室温后，置水浴中加热，使融，融化后取出，放置约45℃时使用。
2.4.使用时，用75%乙醇擦瓶子外围，打开牛皮纸包扎外壳，在火焰附近慢慢旋下棉塞，左手拿培养皿，右手拿三角瓶，慢慢倾倒至培养皿中，每皿注入约
15ml完毕后，将棉塞在火焰上方烧烤数秒，立马塞入瓶口，包上牛皮纸外层，用线绳扎好，留下次使用。（此瓶培养基只允许使用两次，且每次首先倾注一个空白平皿作为对照培养）。
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文献和实验的细胞上清中外泌体含量很少，因为细胞在饥饿状态下会将囊泡作为营养物质吸收（如图 1-B）。这样的换培养基操作主要目的是为了保证细胞要有密度差，确定细胞在正常生长，融合度的数值不是固定的。此培养基无法替代常规培养基，只可用于 48 h 以内短时间培养理论上细胞状态好可以循环多次实验。 A：无外泌体血清组 B：正常血清组 C：外泌体专用无血清培养基组 图 1 三种不同的培养体系的外泌体 TEM 电镜图（Hela 细胞） 通过 TEM 电镜结果图可以简单评估
；磷酸二氢钾0.3g；蒸馏水1000ml。 制备先配液体部分2000ml，氯化钙与氯化镁另装小瓶，高压灭菌（压力6.81公斤20分钟）后冷却，合并一起，取1000ml配固体部分，经沸水浴2～3小时，使完全溶解。若有残渣可用4层纱布过滤除去，趁热将滤液分装试管，每管5ml，高压灭菌，形成斜面，冷却后放冰箱中备用。接种前，每管加液体部分4.5ml和牛血清0.5ml，并加米粉20mg（用大米粉分装小管，经180℃烤箱消毒3次）。 2.洛克氏液鸡蛋血清培养基
。 4、培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？ 多数情况下，细胞在体外培养时需要血清，而血清中一般都含有外泌体，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下两种方法： 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体； 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清（或者外泌体专用培养基）在什么时候使用？ 使用无外泌体血清培养基：细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞汇合度在60% - 70% 时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基，继续
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