- ￥1500 - 2200
- 抚生
- 0.78ng/mL-50ng/mL
- 0.39ng/mL
- A114149
- 国产
- 2026年07月07日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商：
上海抚生
- 库存：
20
- 灵敏度：
0.39ng/mL
- 样本：
血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物：
血清/血浆
- 适应物种：
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用：
ELISA试剂盒
- 检测方法：
ELISA法
- 检测范围：
0.78ng/mL-50ng/mL
- 规格：
48T/96T
| 规格： | 48T | 产品价格： | ￥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 96T | 产品价格： | ￥2200.0 |
通过特异性抗人Hsp27单克隆抗体包被于微孔板，与样本中的Hsp27结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后，形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质，加入TMB底物显色，HRP催化TMB转化为蓝色，酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与Hsp27含量成正比，酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数：
产品名称:人27kDa热休克蛋白(Hsp27)ELISA试剂盒
英文名称:Human Hsp27 ELISA Kit
产品规格：48T/96T
检测样本：血清，血浆，细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围：0.78ng/mL-50ng/mL
灵敏度：0.39ng/mL
特异性：与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期：6个月（2-8℃保存）。
检测流程：
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体（捕获抗体），该抗体能专一识别并结合人27kDa热休克蛋白(Hsp27)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本（如血清、血浆或细胞培养上清）加入微孔中，样本中的Hsp27会与包被抗体结合，形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP（辣根过氧化物酶）标记的第二抗体（检测抗体），该抗体识别Hsp27的另一个独立表位，从而形成“捕获抗体-Hsp27-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后，加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物，在酸性终止液（如硫酸）作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），颜色深浅与样本中Hsp27浓度呈正相关。
数据及参考曲线：
| 校准品浓度(ng/mL) | 50.00 | 25.00 | 12.50 | 6.25 | 3.13 | 1.56 | 0.78 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.620 | 0.834 | 0.493 | 0.320 | 0.165 | 0.099 | 0.031 |
| 校正OD值 | 2.661 | 1.590 | 0.803 | 0.463 | 0.289 | 0.135 | 0.068 | 0.000 |
一. 试剂准备
将试剂盒所有组分平衡至室温（20–25℃，≥30min）；浓缩洗涤液按 1:19 稀释配制工作液。
标准品用标准品稀释液复溶，梯度稀释，配置系列浓度梯度标准溶液，备用。
二. 实验流程
加样：设置空白孔、标准孔、样本孔，每孔加入 100 μL 对应标准品 / 待测样本，封板，37℃恒温孵育 90 min。
洗涤：弃净孔内液体，每孔加满洗涤工作液，静置 30 s，甩干拍净，重复洗涤 5 次。
加酶结合物：每孔加入 100 μL HRP 标记检测抗体，封板混匀，37℃孵育 60 min。
洗涤：重复上述洗涤步骤 5 次，彻底拍干微孔。
显色：每孔避光加入 90 μL TMB 底物显色液，轻柔混匀，37℃避光显色 15 min。
终止：按同等顺序每孔快速加入 50 μL 终止液，轻晃混匀，溶液由蓝转黄。
读数：15 min 内，酶标仪 450 nm 波长测定各孔 OD 值，拟合标准曲线计算样本含量。
三. 关键质控要点
全程孵育使用专用封板膜，防止液体蒸发、交叉污染。
洗涤充分为实验核心，残留洗液易造成背景偏高、假阳性。
TMB 显色液避光储存，现用现加，严禁接触氧化剂。
加终止液顺序需与显色加样一致，避免局部色差、绿色残留。
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