FISH(单标)+IF3标扫描 多重荧光实验服务产品图

FISH(单标)+IF3标扫描 多重荧光实验服务

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  • FISH(单标)+IF3标扫描 多重荧光实验服务
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  • 2026年07月06日
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      上海经科化学科技有限公司

    • 服务名称

      FISH(单标)+IF3标扫描全套

    • 规格

    一、服务简介

    本服务采用分轮标记、分次全景扫描、图像融合一体化科研实验方案,可在单张组织切片同步完成单种核酸片段 FISH 检测与三种靶蛋白免疫荧光检测,实现核酸片段与三种靶蛋白共定位、定性、半定量分析,仅可用于科研实验,不可用于临床诊断。

    技术痛点与方案原理

    常规同步检测存在两类技术难题:免疫荧光所需高温抗原修复会造成目标核酸断裂,引发 FISH 假阴性;若先完成 FISH 再进行蛋白染色,FISH 荧光会在后续实验流程淬灭。
     
    本方案将 FISH 核酸标记、三种靶蛋白免疫荧光分独立轮次依次开展,每轮染色后单独扫描留存最佳荧光图像,全部实验结束后通过软件高精度融合所有通道,同时保障核酸、蛋白两类检测结果的准确性。

    二、服务核心优势

    1. 单张切片可完整保留核酸与三种靶蛋白荧光信号,有效解决多荧光叠加产生淬灭、染料串色问题;
    2. 搭配 TSA 酪胺信号放大技术,提升阳性信号检出灵敏度,同源、异源一抗均可适配;
    3. 高分辨率全景成像,以 DAPI 信号为对齐基准,采用 0.5 像素高精度重合算法匹配各轮扫描画面,融合图像组织对位精准、数据完整;
    4. 配套轻量化图像分析软件,普通办公电脑即可读取全景文件,一键输出共定位细胞数量、阳性比率、细胞密度等量化参数,无需高端服务器。

    三、完整标准实验流程

    1. 样本准备
    2. 热修复处理
    3. 蛋白酶 K 消化处理
    4. 核酸片段 FISH 标记
    5. DAPI 复染细胞核并封片
    6. 切片高清全景扫描,留存 FISH 通道原始图像
    7. 拆除盖玻片,洗脱核酸探针
    8. 专用荧光淬灭设备清除 FISH 荧光基团
    9. 抗原修复
    10. 内源性过氧化物酶封闭处理
    11. 血清封闭
    12. 第一种一抗孵育
    13. HRP 标记二抗孵育
    14. iF488-TSA 荧光标记
    15. 抗体洗脱液洗脱本轮一抗、二抗
    16. 循环执行血清封闭、一抗、HRP 二抗、TSA 标记、洗脱整套流程,依次完成第二、第三种靶蛋白染色;每轮染色后均执行 DAPI 复染、封片、全景扫描、清除荧光基团操作
    17. 全部轮次实验结束后,软件完成所有扫描图像高精度融合处理

    四、样本适配与送样运输规范

    1. 石蜡切片常温保存运输;冰冻切片 - 20℃保存运输。
    2. 细胞爬片、细胞滴片、细胞涂片不适用本方案:拆取盖玻片易造成细胞脱落,多轮扫描无法保证视野完全重合,图像无法正常融合。
    3. 实验全程切片组织形态结构必须保持一致,否则多轮扫描图像无法匹配融合。

    五、交付成果

    FISH 核酸通道、三种靶蛋白各通道分层扫描原图、多通道高精度融合全景图像、核酸与三种靶蛋白共定位定量分析数据文件。
     
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