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FISH(单标)+IF6标扫描 分轮扫描 图像融合实验服务

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  • FISH(单标)+IF6标扫描 分轮扫描 图像融合实验服务
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  • 2026年07月06日
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      上海经科化学科技有限公司

    • 服务名称

      FISH(单标)+IF6标扫描全套

    • 规格

    一、服务简介

    本服务为分轮标记、分次全景扫描、图像融合一体化科研实验方案,可在单张组织切片同步完成单种核酸片段 FISH 检测与六种靶蛋白免疫荧光检测,实现核酸片段与六种靶蛋白共定位、定性、半定量分析,仅可用于科研实验,不可用于临床诊断。
     

    技术原理与解决痛点

    常规同步开展 FISH 与免疫荧光存在两类难题:免疫荧光所需高温抗原修复会造成目标核酸断裂,产生 FISH 假阴性;若先进行 FISH 染色再开展蛋白免疫荧光,FISH 荧光会在后续步骤发生淬灭,两类指标无法同时获得有效检测数据。
     
    本方案将 FISH 核酸标记、六种靶蛋白免疫荧光分独立轮次依次操作,每轮染色后单独扫描留存最佳荧光图像;全部实验完成后通过软件完成高精度图像融合,同步保障核酸、蛋白两类检测结果可靠性。
     

    二、服务核心优势

    1. 单张切片可完整留存核酸与六种靶蛋白多组荧光信号,有效规避荧光淬灭、多荧光染料互相串色干扰;
    2. 配套 TSA 酪胺信号放大技术,放大阳性信号,检测灵敏度更高,同源、异源一抗均可使用;
    3. 高分辨率全景成像,以 DAPI 信号为对齐基准,采用 0.5 像素高精度重合算法匹配各轮扫描画面,融合图像组织匹配完整、检测结果精准;
    4. 配套轻量化图像浏览分析软件,普通办公电脑即可读取全景文件,一键输出共定位细胞数量、阳性比率、细胞密度等量化参数,无需高端服务器硬件。

     

    三、完整标准实验流程

    1. 样本准备
    2. 热修复处理
    3. 蛋白酶 K 消化处理
    4. 核酸片段 FISH 标记
    5. DAPI 复染细胞核并封片
    6. 切片高清全景扫描,留存 FISH 通道原始图像
    7. 拆除盖玻片,洗脱核酸探针
    8. 专用荧光淬灭设备清除 FISH 荧光基团
    9. 抗原修复
    10. 内源性过氧化物酶封闭处理
    11. 血清封闭
    12. 第一种一抗孵育
    13. HRP 标记二抗孵育
    14. iF488-TSA 荧光标记
    15. 抗体洗脱液洗脱本轮一抗、二抗
    16. 循环执行血清封闭、一抗、HRP 二抗、TSA 标记、抗体洗脱整套流程,依次完成第二至第六种靶蛋白染色;每轮结束后均执行 DAPI 复染、封片、全景扫描、清除荧光基团操作
    17. 全部轮次实验完成后,软件对所有扫描图像开展高精度融合处理

    四、样本适配与送样运输规范

    1. 石蜡切片常温保存运输;冰冻切片 - 20℃保存运输。
    2. 细胞爬片、细胞滴片、细胞涂片不适用本方案:拆除盖玻片易造成细胞脱落,多轮扫描无法保证视野完全重合,图像无法正常融合。
    3. 实验全程切片组织形态结构必须保持一致,否则各轮扫描图像无法匹配融合。

     

    五、交付成果

    FISH 核酸通道、六种靶蛋白各通道分层扫描原图、多通道高精度融合全景图像、核酸与六种靶蛋白共定位定量分析数据文件。
     
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