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- 技术资料
| 名称 | HMEC-1 人微血管內皮細胞株(STR鉴定) |
| 别名 | Hmec-1; HMEC1; CDC/EU.HMEC-1; Human Microvascular Endothelial Cell line-1 |
| 种属 | 人 |
| 细胞形态 | 血管内皮类 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 培养条件 | MCDB131 培养基(GIBCO货号:10372019)+10% FBS+hEGF (10ng/ml)+1% P/S。气相:空气,95%;二氧化碳,5%。温度:37℃。湿度:70%-80% |
| 推荐传代比例 | 1:2-1:3 |
| 换液频率 | 2-3次/周 |
| 冻存条件 | 冻存液:90% FBS+10% DMSO;温度:液氮 |
| 背景描述 | HMEC-1是一种内皮样细胞,从一名男性患者的包皮内皮中分离出来。该细胞系由 Kathryn Kellar 博士于 1990 年保藏,可用于心血管疾病研究。用 pSVT 载体转染从人包皮分离的微血管内皮细胞,pSVT 载体是一种基于 pBR-322 的质粒,含有猿猴病毒 40A 基因产物的编码区,即大 T 抗原。细胞表达 von Willebrand 因子 (vWF)、细胞粘附分子 ICAM-1,并且能够摄取乙酰化 LDL评论HMEC-1,已被充分表征并显示保留了内皮细胞的许多特征。因为它们是人类内皮微血管细胞的持续可再生来源,可以在许多研究中用作原代人类真皮内皮细胞的替代品。(经查文献该细胞有传代次数限制,不是无限传代的细胞)。 |
| 组织来源 | 真皮;微血管内皮 |
| 生物安全等级 | BSL-2 |
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文献和实验P16 p16于1976年初被发现,定位于9p21,全长8.5kb,有3个外显子和两个内含子,其基因产物为P16蛋白,相对分子质量 为15 840,为148个氨基酸组成的单链多肽蛋白。p16是人类肿瘤中最常见的抑癌基因,是细胞周期蛋白激酶抑制剂。它通过结合并抑制细胞周期依赖的蛋白激酶CDK4和CDK6,导致Rb的磷酸化抑制来调控细胞通过G1期。在人乳腺上皮细胞(HMEC)中,p16基因CpG岛的逐步甲基化使其逐渐失活。p16的逐渐失活使HMEC突破增生抑制
Transwell侵袭实验总结 -Transwell的其他应用的实验步骤
(Biofluids)冲洗一次。 (4). 冲洗过后,将得到的细胞悬液用台盼兰测定活力,若存活率大于90%,则将细胞以106/cm2密度接种于可通透的多聚碳滤膜上(12 mm SNAPWELL, Costar),以37°C 5%CO2-95% 空气含5% 胎牛血清(Gibco-BRL) and 100 U/ml 青霉素and 100ug/ml 链霉素的LHC-8 medium孵育6~10天。 (5). 孵育后,经测定跨上皮电阻在1000~2000Ω之间,即可用于电生理试验。 显微镜下气管上皮细胞形细胞
14 ― 3 ― 3 σ 14―3―3σ定位于lp35。14―3―3σ基因的功能主要是使DNA损伤后细胞周期停止于G2期。正常情况下,DNA损伤诱导14―3―3σ基因表达,并使细胞停止于G2期。但在原发性膀胱癌、结肠癌、乳腺癌中14―3―3σ基因的表达下调。对这种表达下调的分子机制研究表明,其原因主要是14―3―3σ基因第一外显子区的高甲基 化,而不是杂和型缺失、基因突变等。用亚硫酸钠处理基因组测序,并进行甲基化敏感PCR等研究发现,在HMEC、永生的乳腺
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