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人N-酰基乙醇氨酸酰化酶(NAAA)ELISA试剂盒

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  • ¥1500 - 2200
  • 抚生已认证
  • 0.312ng/mL-20ng/mL
  • 0.156ng/mL
  • A114432
  • 国产
  • 2026年06月26日
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    • 详细信息
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    • 供应商

      上海抚生

    • 库存

      20

    • 灵敏度

      0.156ng/mL

    • 样本

      血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本

    • 标记物

      血清/血浆

    • 适应物种

      大鼠、小鼠、人、植物

    • 应用

      ELISA试剂盒

    • 检测方法

      ELISA法

    • 检测范围

      0.312ng/mL-20ng/mL

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:¥1500.0
    规格:96T产品价格:¥2200.0
    检测原理:
    通过特异性抗人NAAA单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的NAAA结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与NAAA含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
    性能参数:
    产品名称:N-酰基乙醇氨酸酰化酶(NAAA)ELISA试剂盒
    英文名称:Human NAAA ELISA Kit
    产品规格:48T/96T
    检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
    检测范围:0.312ng/mL-20ng/mL
    灵敏度:0.156ng/mL
    ‌特异性‌:与人其他细胞因子无交叉反应。
    ‌有效期‌:6个月(2-8℃保存)。
    检测流程:
    1、固相抗体包被‌
    微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合人N-酰基乙醇氨酸酰化酶(NAAA)中的特定表位。
    2、样本加入与抗原结合‌
    将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的NAAA会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
    ‌3、酶标二抗结合‌
    加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别NAAA的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-NAAA-检测抗体”的三明治结构。
    4、显色反应‌
    洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
    5、定量分析‌
    使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中NAAA浓度呈正相关。
    数据及参考曲线:
    校准品浓度(ng/mL) 20.00 10.00 5.00 2.50 1.25 0.63 0.31 0.00
    OD450/630值 2.725 1.569 0.860 0.496 0.307 0.158 0.096 0.048
    校正OD值 2.678 1.521 0.812 0.448 0.260 0.110 0.049 0.000

    产品细节图片1

    操作步骤:
    一、试剂准备

    所有试剂使用前平衡至室温(18–25℃);
    洗涤液按比例稀释(如10×稀释为1×);
    标准品用稀释液复溶并进行倍比稀释(如0、0.5、1、2、4、8 ng/mL)。
    ‌二、加样‌
    设立标准孔、样本孔和空白孔(仅加稀释液);
    每孔加入50 μL标准品或待测样本;
    可对血清/血浆样本进行1:2预稀释以减少基质干扰。
    三、温育
    封板后37℃温育60分钟,使抗原充分结合;
    温育期间避免阳光直射。
    四、洗涤
    弃去孔内液体,每孔注入300–350 μL洗涤液;
    静置30秒至1分钟,甩干,重复5次;
    拍干微孔板,避免残留液滴影响后续反应。
    ‌五、加酶标抗体‌
    每孔加入100 μL生物素化检测抗体;
    37℃避光温育60分钟。
    ‌六、再次洗涤‌
    同上法洗涤5次,确保彻底清除未结合抗体。
    ‌七、加HRP-亲和素‌
    每孔加入100 μL HRP标记亲和素;
    37℃避光温育30–60分钟。
    八、第三次洗涤
    再次洗涤5次,拍干。
    ‌九、显色‌
    每孔加入显色剂A和B各50 μL(或TMB单组分90–100 μL);
    37℃避光显色15–30分钟,观察颜色变化。
    ‌十、终止反应‌
    每孔加入50 μL终止液,轻轻震荡混匀;
    溶液颜色由蓝变黄,立即进行测定。
    ‌十一、读数与分析‌
    使用酶标仪在450 nm波长下测定OD值;
    以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准曲线;
    将样本OD值代入方程,计算TPS浓度。
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