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- 2026年06月20日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
100×Fast Agarose Gel Buffer
- 库存：
现货
- 供应商：
上海圻明
- 规格：
250 mL
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文献和实验过硫酸胺 0.1 g ，加超纯水1.0 mL 溶解后，4 ℃ 保存，保存时间为 1 周。（-20 ℃长期保存） 30% 丙烯酰胺 溶于总体积为 50 mL 的水中，定容至 100 mL。室温保存于棕色瓶。 10× PBS（2L） NaOH 调 pH 值至 7.4，定容至 2 L。保存于室温。 还原型 5×SDS 上样缓冲液 混匀后，分装于 1.5 mL 离心管中，4 ℃ 可保存数周，-20 ℃ 可长期保存。 电泳液缓冲液 加蒸馏水溶解定容至 1000 mL 室温保存，1 次溶液可重复
样本准备 蛋白提取 所需仪器：匀浆器、RIPA 裂解液、PMSF（蛋白酶抑制剂）、磷酸酶抑制剂、剪刀、镊子，消毒酒精棉、PBS、移液器、离心机。 裂解液配制——RIPA 裂解液：PMSF=100：1。 1） 组织处理：首先用酒精棉消毒剪刀和镊子，取适量的组织于匀浆器中，用剪刀剪碎加适量的裂解液冰水中匀浆 1-4 min。匀浆结束后吸取溶液于 EP 管中保存备用。（含血液较多的组织可先用 PBS 清洗后再匀浆） 2） 细胞处理： A、 贴壁细胞处理：去掉培养基用 PBS 清洗后加入适量的裂解
操作篇：western blot 之 SDS－PAGE 电泳
20-50μl 蛋白（注意：根据自己的实验需要进行选择，没有固定的量）的溶液体积即为上样量。 取出上样样品至 200μl 的 EP 管中，加入 5×SDS 上样缓冲液至终浓度为 1×。（上样总体积一般不超过 15μl，加样孔的最大限度可加 20μ 样品，其实大一点的垂直电泳槽每孔最大上样量可以达到 40μl，胶做得很好的话 50μ 也是问题不大的）上样前要将样品于沸水中煮 5-10 min 使蛋白变性。 本人心得：可以使用 PCR 仪进行变性，加快速度，这样就不用将水煮
技术资料暂无技术资料 索取技术资料
