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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
Protease Inhibitor Cocktail Mammalian Cell Specific Animal Component-Free
- 库存:
现货
- 供应商:
上海圻明
- 规格:
1 mL
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文献和实验剂的蛋白质抽提剂(107 个细胞中加入1ml抽提试剂;5×106 个细胞中加入0.5ml抽提试剂),轻轻摇动5分钟5、细胞悬浮液到离心管中,冰浴下摇动15分钟进行裂解。6、裂解液于预冷的离心机中14,000×g离心15分钟。弃去沉淀,上清液蛋白质抽提物立刻转移入新的离心管中保存待用(-80o C或液氮中)。三、哺乳动物组织的蛋白质抽提步骤1、组织称重,切小块放入管中。3、PriCells蛋白质抽提剂(1ml抽提试剂中加入5μl蛋白酶抑制剂混合液\5μlPMSF和5μl磷酸酶混合液等等)。3、加入预冷
这一从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序系为Favaloro 等(1980)所介绍程序的改良。该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分散成单个细胞的哺乳动物组织中分离RNA。但不适用于从固体组织中提取RNA,因为用这种裂解细胞的方法(在SDS存在的条件下用蛋白酶K消化)去消化组织速度很慢,导致内源性RNA酶在被蛋白酶K消化或被抑制剂灭活前有时间发挥作用。原方案中(Favaloro等。1980)采用的裂解缓冲液含有0.015 %(W/V)的Macaloid(硅藻
数培养液中使用酚红作为 pH 指示剂。红色表示中性 pH,黄色代表酸性 pH,紫色表 示碱性 pH。但是,在一些特殊培养液中不含酚红,因为已有一些研究表明:酚红能模拟类固醇激素(尤其是雌激素)样作用。丙酮酸钠:是细胞液中细胞的另一种碳源。D-葡萄糖是细胞优选碳源,但是当培养液中 D-葡萄糖耗 尽时,细胞可以代谢丙酮酸钠获取碳源。抗生素哺乳动物细胞冷冻保存主要目的:(1)保存种子细胞,以便随时取用。这是保存细胞的最主要目的。(2)减少细胞被微生物污染的危险性。(3)减少细胞之间交叉污染的危险
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