护谷【1836-75-5】

交联染色质免疫共沉淀（X-ChIP）实验设计

。加入甘氨酸可以消除甲醛使交联反应终止。1.1.准备两个长满细胞的150cm2的细胞培养皿（1*107-5*107 个细胞/皿）。将甲醛直接滴入PBS洗过的细胞培养皿中，使其终浓度为0.75%，然后在室温缓慢旋转10分钟，使蛋白和DNA发生交联。1.2 加入甘氨酸使其终浓度为125mM,在室温晃动孵育5分钟。1.3 使用10ml预冷PBS清洗细胞2次1.4 使用细胞刮将细胞收获放入 5ml 预冷PBS中，并转入50ml的管子。1.5.在皿里加入3mlPBS，将剩余的细胞转移到50ml管子里1000g

正常小鼠原代真皮纤维原细胞培养

抗体，荧光标记二抗，乙醇丙酮混合液（1：1）二、实验器械1、培养皿2、培养瓶3、直剪和眼科剪4、眼科镊5、玻璃滴管6、15ml离心管7、200目网筛三、实验流程取材↓取皮片，削成厚度为0.5mm的皮片↓皮片浸泡在75%酒精中消毒↓1 × PBS （pH 7.4 ）清洗皮片两遍↓皮片剪成（3-5）mm×（10-15）mm大小↓置于消化液中4℃消化过夜↓剥去表皮，并刮去真皮下的其他组织↓将组织块剪成1mm3 左右↓加入消化液，37℃消化至消化液浑浊↓停止消化，悬液过200目网筛↓收集细胞悬液，800

类器官培养与应用——肺类器官

的 Matrigel 在 4°C 下过夜解冻，在 6 孔板的每孔滴加 1ml 冷的 Matrigel，旋动 6 孔板使 Matrigel 溶液分布均匀。随后转移至 37℃ 条件下孵育 10min 使其凝固，使用前需室温静置 1h。 2、将 hPSCs 接种在包被 Matrigel 的 6 孔板中，每孔加入 3ml mTeSR1，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中，培养至细胞汇合度约为 75-85%、且大部分无分化的状态时，吸出培养基。 3、向 hPSCs 中加入1ml Dispase（1mg/ml），并将培养