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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
12
- 英文名:
Rat Oral Epithelial Cells
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
视天气状况和运输距离远近
- 细胞形态:
上皮样,不规则细胞
- 物种来源:
大鼠,其他咨询
- 组织来源:
实验动物的口腔黏膜组织
- 规格:
5*10^5
大鼠原代口腔黏膜上皮细胞
口腔上皮细胞是一种上皮细胞。人的口腔上皮细胞是扁平、多边形的,形状不很规则。 口腔各壁都有黏膜覆盖。口腔上皮细胞主要分布在口腔两侧颊部。
上皮的垂直切面上,细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状,为具有增殖分化能力的干细胞,部分子细胞向浅层移动。基底层以上是数层多边形细胞,再上为几层梭形或扁平细胞。仅靠近表面几层细胞为扁平状,基底层细胞能不断分裂增生,以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的毛细血管,有利于复层扁平上皮的营养。
基础产品信息
1. 标准命名
中文:大鼠原代口腔黏膜上皮细胞(大鼠口腔上皮细胞 / OMEC)
英文:Primary Oral Mucosal Epithelial Cells, Rat
货号:XY-yd0821(烜雅生物)
2. 来源与种属
实验动物:6~8 周健康 SD 大鼠(可定制 Wistar 大鼠)
取材组织:口腔颊部复层扁平黏膜组织
分离工艺:中性蛋白酶预消化 + 胰蛋白酶 -Ⅰ 型胶原酶联合消化法,去除成纤维细胞杂细胞纯化制备
3. 常规产品规格(两种发货形态)
冻存管装(干冰运输)
1mL 冻存悬液 / 管,细胞总量≥5×10⁵ cells,细胞活率>85%(台盼蓝染色)
T25 活细胞瓶(常温运输)
T25 培养瓶,5×10⁵ cells / 瓶,汇合度 70% 左右,瓶内预装专用完全培养基
细胞核心生物学特性
形态特征
典型上皮样多边形、不规则铺路石状;基底层细胞矮柱状,增殖活跃;表层细胞扁平,无梭形成纤维杂细胞
生长方式:严格贴壁依赖培养,需胶原包被培养皿 / 瓶
鉴定指标(纯度>90%)
上皮标志物:广谱角蛋白 PCK、CK18 免疫荧光阳性
阴性对照:Vimentin(成纤维细胞标志物)阴性,无间质细胞污染
紧密连接蛋白 E-cadherin、ZO-1 表达阳性,维持上皮屏障功能
传代能力:原代细胞体外有限增殖,仅稳定传 1~2 代,不建议长期传代;传代比例 1:2
无菌质控
支原体、细菌、真菌、酵母菌、HIV-1/HBV/HCV 全部阴性;内毒素<3EU/mL
配套培养体系
1. 专用完全培养基
基础配方:DMEM/F12 + 5% 胎牛血清 + 上皮细胞生长添加剂 + 1% 双抗(青霉素 / 链霉素)
储存:2~8℃避光,有效期 6 个月
换液频率:每 2~3 天全量换液
2. 必需辅助试剂
培养瓶包被:Ⅰ 型鼠尾胶原蛋白,包被浓度 2~5μg/cm²,提升贴壁效率
消化液:0.25% 胰蛋白酶(无 EDTA 可选),37℃消化 1~2min 即可脱壁
中和:完全培养基直接终止消化
3. 标准培养环境
恒温 37℃,5% CO₂,95% 空气饱和湿度孵箱
运输、储存与复苏操作
1. 运输方案
冻存细胞:干冰泡沫箱全程冷链运输
活细胞 T25 瓶:常温避光运输,到货立即移入 37℃孵箱
2. 储存条件
冻存管到货短期存放:-80℃冰箱可保存 1 个月;长期保存必须转入液氮罐,严禁 - 20℃存放
活细胞瓶:37℃ 5% CO₂孵箱,不可冷藏
3. 标准复苏流程
37℃水浴快速融化冻存管(1min 内完全融解)
加入 3~5 倍体积完全培养基稀释冻存液,1000rpm 离心 5min 弃上清
胶原预包被 T25 瓶接种,37℃静置过夜待贴壁,次日换液去除死细胞
4. 传代操作要点
细胞汇合度 85%~95% 时传代;PBS 清洗 2 次,短时间胰酶消化,轻柔吹打,避免机械损伤上皮细胞
产品包装与文件配套
包装:冻存管 / 细胞培养瓶 + 保温箱 / 干冰;配套 COA 质检报告、完整说明书、复苏传代操作手册
保质期:液氮冻存细胞有效期 12 个月;配套完全培养基 6 个月
注意事项
本品仅用于体外科学研究,不可用于动物活体注射、人体临床诊疗
原代上皮细胞增殖能力弱,收到后尽快复苏 / 传代,避免长期存放
全程使用上皮专用培养基,普通高糖 DMEM 会快速诱导细胞分化、凋亡
培养器皿必须胶原包被,否则细胞贴壁差、大量漂浮死亡
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文献和实验大鼠原代口腔黏膜上皮细胞
本人把大鼠原代肾小管上皮细胞的取材、培养方法进行了总 结,请分享! 取材:1.肾小管节段的分离(机械网筛滤过法): ①取 Wistar 大鼠断颈法处死,立即置入碘伏液中浸泡 5 分钟。 ②将大鼠转移入超净工作台,取腰部切口迅速取出肾脏,置于盛有生理盐水的培养皿中清洗并除去包膜和肾蒂组织。 ③取皮质置于80目筛网上,剪碎成1-2mm3大小组织块,网下放盛有少量生理盐水的培养皿。 ④用玻璃注射器内芯于80目网上充分研磨组织。 ⑤收集 80 目网下液体转移至 100
PriCells-原代上皮细胞与原代成纤维细胞培养的分离纯化原代细胞、传代细胞绝大多数都呈混合生长,既有上皮样细胞又有纤维样细胞,纤维样细胞又包括成纤维细胞、肌细胞、骨细胞、滑膜细胞等。混杂的细胞会直接影响实验结果。在体外培养原代细胞时,为了保证实验结果的可靠性、一致性、稳定性、和可重复性,要求采用单一种类细胞来进行实验,这样才能对某一细胞的功能、形态等变化进行一系列研究,因而培养细胞的纯化就成为实验研究的重要一步,甚至需要从混杂的细胞群中分离出单个细胞来进行培养和开展实验研究。一、原代
原代 肺泡上皮 细 胞 ( Primary Alveolar Epithelial Cell s ) 的体外分离培养 1 、完全无血液残留肺 脏组织 2、消化肺 组 织 :常用细胞消化酶:胰蛋白酶、弹性蛋白酶、胶原酶。经支气管将酶灌注到完整的肺中消化,或把肺组织剪碎放入消化液中消化。前者比后者更有效。3 、分离 纯 化 细 胞 :原代肺泡上皮细胞的分离纯化主要方法:(1)密度梯度离心法:密度梯度离心分离细胞的原理是不同细胞的沉降系数不同,在密度梯度离心中细胞所处的位置也相应不同
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