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- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海抚生
- 库存:
20
- 灵敏度:
0.078ng/mL
- 样本:
血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本
- 标记物:
血清/血浆
- 适应物种:
大鼠、小鼠、人、植物
- 应用:
ELISA试剂盒
- 检测方法:
ELISA法
- 检测范围:
0.156ng/mL-10ng/mL
- 规格:
48T/96T
| 规格: | 48T | 产品价格: | ¥1500.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 96T | 产品价格: | ¥2200.0 |
通过特异性抗人EZH2单克隆抗体包被于微孔板,与样本中的EZH2结合形成固相抗体复合物。加入HRP标记的检测抗体后,形成抗体-抗原-酶标抗体三明治结构。经洗涤去除未结合物质,加入TMB底物显色,HRP催化TMB转化为蓝色,酸性终止液使颜色变为黄色。颜色深浅与EZH2含量成正比,酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。
性能参数:
产品名称:人Zeste同源物增强子2(EZH2)ELISA试剂盒
英文名称:Human EZH2 ELISA Kit
产品规格:48T/96T
检测样本:血清,血浆,细胞培养上清及其他生物学样本。
检测范围:0.156ng/mL-10ng/mL
灵敏度:0.078ng/mL
特异性:与人其他细胞因子无交叉反应。
有效期:6个月(2-8℃保存)。
检测流程:
1、固相抗体包被
微孔板预先包被一种高特异性的单克隆抗体(捕获抗体),该抗体能专一识别并结合人Zeste同源物增强子2(EZH2)中的特定表位。
2、样本加入与抗原结合
将待测样本(如血清、血浆或细胞培养上清)加入微孔中,样本中的EZH2会与包被抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。未结合的成分在后续洗涤步骤中被清除。
3、酶标二抗结合
加入HRP(辣根过氧化物酶)标记的第二抗体(检测抗体),该抗体识别EZH2的另一个独立表位,从而形成“捕获抗体-EZH2-检测抗体”的三明治结构。
4、显色反应
洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入TMB底物溶液。HRP催化TMB产生蓝色产物,在酸性终止液(如硫酸)作用下变为黄色。
5、定量分析
使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),颜色深浅与样本中EZH2浓度呈正相关。
数据及参考曲线:
| 校准品浓度(ng/ml) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.663 | 1.588 | 0.841 | 0.488 | 0.370 | 0.169 | 0.097 | 0.017 |
| 校正OD值 | 2.647 | 1.571 | 0.824 | 0.471 | 0.353 | 0.152 | 0.081 | 0.000 |

1. 试剂回温至 20–25℃,稀释洗涤液、梯度配制标准品。
2. 每孔加 100μL 标准 / 样本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗体,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光显色 15min,加终止液混匀。
5. 450nm 快速测 OD 值,拟合曲线算浓度。
公司正在出售的产品:
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文献和实验家公司的免疫沉淀试剂盒还是 SimpleChIP® 试剂盒,结果均是如此。在分析稳定性较低的相互作用,比如 polycomb 蛋白(Ezh2 [D] 或 SUZ12 [E])与特定基因的结合时,这一点尤其明显。 第 3 步 - 选择抗体 非高度特异的靶标抗体可能会出现不可预见的结合并增加背景信号,从而增加检测低丰度或低稳定性相互作用的难度。 您的抗体应该满足以下标准: 靶标特异性: 抗体应与阳性/阴性对照细胞系、敲除细胞或经过 siRNA
怎么办? ChIP 是一项富集技术,不是纯化方法。大部分我们感兴趣的蛋白或组蛋白修饰分布在整个基因组,只是不同区域的富集度不同。因此,有意义的结果需要高效的富集。 传统的 ChIP 实验需要至少两百万细胞作为起始材料,这对于有些珍贵细胞样本是非常困难的。解决这个问题的关键是通过 ChIP 的 buffer 及条件优化,降低非特异性的背景,实现最优的信噪比。 针对这个问题,一方面通过 buffer 条件优化,提供高灵敏 ChIP 试剂盒,最少可用 1000 个细胞进行 ChIP
Active Motif ChIP 技术专家经验分享:如何才能做好 ChIP 实验?
,DMA,DSG,DSP,EGS[11-13]。第二步 染色质片段化染色质交联之后,需要通过超声或酶切的办法将染色质片段化。大部分实验室偏好于用前者,而很多做 ChIP 试剂盒的公司根据客户的需求(有些没有超声仪,有些把握不好超声条件),也大都推出了用广谱的核酸内切酶 MNase(Micrococcal Nuclease)酶切将染色质片段化的试剂盒。不管是用超声还是酶切,染色质片段化大小是 ChIP 实验的一个关键点。以超声为例,打断后的 DNA 片段大小以 200~1 000 bp 为宜。DNA
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