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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
原代细胞
- 供应商:
上海烜雅生物科技有限公司
- 库存:
13
- 英文名:
Rat Aortic Adventitial Fibroblasts Cells
- 生长状态:
贴壁培养
- 运输方式:
视天气状况和运输距离远近
- 细胞形态:
长梭形细胞,不规则细胞
- 物种来源:
大鼠,其他咨询
- 组织来源:
实验动物的正常主动脉组织
- 规格:
5*10^5
大鼠原代主动脉外膜成纤维细胞
主动脉是由内膜、中层弹力层和外膜构成,三层紧密贴合在一起。其中,外膜是专门的支持组织,外膜成纤维是外膜的主要成分,在血管炎症反应、血管重塑等方面发挥重要作用。
产品信息
种属与来源
SD 大鼠(Sprague-Dawley),8~9 周龄健康成年大鼠,取材胸 / 腹主动脉外膜结缔组织,剔除血管内膜、中膜后胶原酶 + 胰酶联合消化分离,差速贴壁纯化制备,P1 代冻存 / 现货活细胞。
产品规格
活细胞:
5×10 5cells/T25
培养瓶,常温保温运输
冻存细胞:
5×10 5cells/
冻存管,干冰运输(冻存液:90% FBS+10% DMSO)
产品用途:仅限体外科研使用,不可用于活体动物给药、人体临床与体外诊断试剂生产。
细胞生物学特性
1. 形态与生长
细胞形态:贴壁生长,长梭形、星型扁平成纤维样,胞核卵圆形、核仁清晰;汇合后呈旋涡状排布。
传代能力:原代体外可稳定传3~5 代,P1-P3 细胞活性最-优,建议 3 代内完成全部实验;常规传代比例 1:2,2~3 天传代一次。
倍增周期:48~72h,每 2~3 天全换液 1 次。
2. 纯度与质控指标
标志物鉴定:Vimentin(波形蛋白)免疫荧光阳性,α-SMA 平滑肌标志物阴性,排除血管平滑肌细胞污染;细胞纯度≥90%。
微生物检测:支原体、细菌、真菌、酵母、HIV/HBV/HCV 全部阴性,附 COA 质检报告。
标准培养方案
1. 完全培养基配方(专用配套培养基最-优)
基础 DMEM 高糖 + 10% 特级胎牛血清 + 1% 成纤维细胞生长添加剂 + 1% 青链霉素双抗(100U/mL 青霉素 + 100μg/mL 链霉素)。
2. 培养环境
37℃恒温、95% 空气 + 5% CO₂饱和湿度培养箱(70%~80% 湿度)。
3. 消化与冻存
消化液:0.25% 胰蛋白酶 - EDTA 溶液,室温消化 2~3min 终止。
长期保存:冻存细胞收货后立即转入液氮罐(-196℃),严禁 - 20℃/-80℃长期存放、反复冻融。
收货与储存说明
T25 活细胞(常温到货):开箱直接放入 37℃培养箱静置 4~6h,细胞汇合>85% 即刻传代;
冻存管细胞(干冰到货):收到立即液氮保存,复苏采用 37℃水浴速融法;
配套选购:同批次专用完全培养基、细胞冻存液、PBS 缓冲液、0.25% 胰酶。
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文献和实验大鼠原代主动脉外膜成纤维细胞
PriCells –正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:肌动蛋白
1% 肝素钠 0.2ml 后经左心室行主动脉插管, 血管钳固定后剪开右心耳,先以生理盐水 150ml 快速冲洗血管,然后用4%多聚甲醛的 0.01mol/LPBS(4℃,PH7.40)250ml 灌注固定,先快后慢,共需时间为 50min,之后取材,置4%多聚甲醛固定液后固定,在 4℃ 冰箱内保存。多聚甲醛进入大鼠体内,大鼠会出现四肢、尾的抽搐,最终以肝脏发白、内脏鼓起即灌注好。 三、脑组织免疫组化实验 1. 灌注固定用的针头,一般都用注射针头。灌注大鼠一般可用10到12号针头,小鼠可用 6、7 号针
材料与方法: 材料 : 培养皿、培养瓶、烧瓶、试管,玻璃针等。 眼科剪、眼科镊、手术刀片。 5%CO2孵箱、PH计。 恒温水浴箱。 PMi1640培养基,D-Hank’s缓冲液 、胎牛血清,内皮生长因子(ECGF),青霉素,链霉素,戊巴比妥钠等。 方法: 1、取材:4~6wWistar大鼠, 大剂量2%戊巴比妥钠麻醉处死,将处死后的大鼠浸入75%酒精中,放入超净台。在无菌状态下剪开胸腹腔,分离胸主动脉,用2ml注射器从主动脉弓处向胸主动脉注入D-Hank’s液,驱除残血,取主动脉
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