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种属 | 兔 |
组织来源 | 正常膈肌组织 |
传代比例/细胞消化 | 1:2传代,消化2-3分钟。 |
完全培养基配置 | 基础培养基500ml;生长添加剂5ml;胎牛血清50ml;双抗5ml |
简介 | 膈肌是位于胸腔与腹腔之间的肌肉纤维组织,其周围为肌腹,中央为腱膜,是机体重要的呼吸肌,组织学上,膈肌属骨骼肌,成熟的骨骼肌纤维不具有增殖能力。骨骼肌卫星细胞是骨骼肌与肌膜之间的一种体积较小的细胞,排列在肌纤维的表面,当肌纤维损伤后,可分化为肌纤维修复损伤。随着组织发育的成熟,肌卫星细胞数量相对减少。 |
形态 | 长梭形细胞样 |
细胞检测 | 肌动蛋白(α-actin)免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 |
生长特征 | 贴壁生长 |
倍增时间 | 每周 2-3次 |
培养条件 | 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。 |
冻存条件 | 冻存液:90%FBS,DMSO 10%, 或使用非程序冻存液: |
产品使用 | 仅限于科学研究,不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。 |







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文献和实验较简单;但容易产生杂质如成纤维细胞等,成纤维细胞生长快,故培养之细胞质量较差;培养的大多数细胞无收缩性;且原代细胞的获得需3~4周,获得大量平滑肌细胞耗时长(17)。既往酶消化法较组织块法复杂、精细;适宜的酶浓度和培养时间的确定较为困难;然而在较短时间内可获得大量的平滑肌细胞,1996年有学者报道(Chambers(18)等)酶消化法纯度为70%。可见一种快速、高效、高纯度的酶消化法培养膀胱平滑肌的方法显得尤为重要。 本实验研究两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑肌细胞
操作演示
实验步骤(一)、取SD 大鼠一只,实验时断椎处死。(二)、在无菌条件下快速自肛门上2 cm 取结肠10 cm 左右,生理盐水中反复灌肠冲洗。(三)、移入含300 U/ml青霉素、300 U/ml 链霉素的HepesRinger缓冲液中浸泡,肠段内外各15 min。(四)、将经抗生素浸泡过的肠段移入含Hepes Ringer缓冲液的塑料培养板中(培养板预先铺上705胶),在体视显微镜下沿肠系膜对侧纵行切开肠段,皮内针固定好四角,仔细地刮除粘膜层,翻转至外侧,小心地撕去肠系膜,再仔细地刮去浆膜
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