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文献和实验从一处转移到基因组另一处的过程叫转位( transposition ),这些游动的基因叫转位子。 一、基因工程的常用工具 (一)载体 载体( Vector )是把外源 DNA (目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具。载体有质粒( plasmid )、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记;有供外源 DNA 插入的位点;本身体积小等特征
关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
SDS-PAGE从胶中纯化蛋白质浸提液母液:0.5 mol/L Tris-CI pH 7.91.0 mmol/L EDTA1.5 mol/L NaCL1.0 % SDS上述各取1ml 混匀,加入6 ml 水,混匀,即为10ml 浸提液。回收蛋白方法:1. 使用厚胶,设两个样品孔,一个为蛋白marker,另一为样品。2. 电泳结束后,将Marker和少许样品带切下,进行染色和脱色。剩余样品胶置于4 ℃。3. 根据Marker和被染色的样品带,切下未被染色的胶中蛋白带。4. 称重,研碎,加入3~
第一章 质粒DNA的分离、纯化和鉴定 第一节 概 述 把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制和转录能力,能在子代细胞中保持恒定的拷贝数,并表达所携带的遗传信息。质粒的复制和转录要依赖
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