Thermo Scientific (Alfa Aesar)

基因芯片实验原理与方法（一）

Cartesian 7500点样仪 Cartesian公司　　硅烷化玻片 TeleChem公司　　PCR仪器四、试剂 •组织或细胞样本　　•Oligo-dT (T15) - Roche 　　•dNTPs (in buffer 50 mM Tris pH 8) 　　•RNasin - Promega 　　•Superscript II - Life Technologies 　　•Qiaquick PCR purification system - QIAGEN 　　•22 x 50 mm cover

测定鱼中二噁英PCDDs/PCDFs、类二噁英多氯联苯、非类二噁英多氯联苯

素标准品。 分析 根据不同情况，浓缩萃取物，经过多步色谱纯化：硅胶/硫酸，氧化铝和Florisil柱。通过HRGC/HRMS测定分析PCDD/Fs和PCBs。使用Thermo Scientific Trace-GC-Ultra和Thermo Scientific DFS高分辨质谱。目标分析物通过DB-5MS色谱柱(60 m x 0.25 mm x 0.25 μm)分离。PCDD/Fs and PCB的浓度通过同位素稀释法测定。 结果 快速溶剂萃取SpeedExtractor E

双向电泳蛋白点的切取和保存

1. 用 PDQuest软件或肉眼比对，找出感兴趣的蛋白点，并做好标记和记录。 2. 用 MilliQ水冲洗胶 2 次。 3. 用色谱纯甲醇和 MilliQ水冲洗 Ep 管 4. 将枪头(200μl)下端剪去，使其内径略小于蛋白斑点的直径，用色谱纯甲醇和MilliQ水冲洗枪头。 5. 对准斑点中央小心将蛋白切割下来，放入Ep 管，MilliQ水漂洗 2 次，如胶块 太大，将其切成 1 x 1 mm 的胶片。 6. 将切好的点做好标记和记录，置- 80℃ 保存或冻干