人膀胱平滑肌细胞

兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定

一、摘要 目的：建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法：成年新西兰白兔两只（正常及梗阻各一只），采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养，观察细胞形态和扩增情况，用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白（α-actin）鉴定细胞类型。结果：倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑肌细胞

膀胱（urinary bladder）

　　 贮存尿液的囊性器官，其大小、形状、位置和膀胱壁的厚度均随尿液充盈程度而异。成人正常容量为 300～ 500毫升，最大容量可达 800毫升。空虚的膀胱位于小骨盆内，呈三棱锥体形，前上部称膀胱顶，后下部呈三角形称膀胱底，顶、底之间为膀胱体。当膀胱充盈时呈卵圆形，可超出小骨盆腔与腹前壁接触，触诊时可在腹下部摸到。膀胱壁由粘膜、粘膜下层、肌层和外膜组成。粘膜被覆于膀胱内面，除膀胱三角区外，经粘膜下层与肌层疏松连接。膀胱收缩时，粘膜聚集成皱襞，膀胱充盈时皱襞消失。在膀胱底部，左、右

膀胱平滑肌细胞原代培养

1、麻醉后消毒，下腹正中切口于膀胱颈（结扎处远端约1~2cm），严格无菌操作取出标本、手术台位于超净台旁2、在超净台，40u/ml庆大霉素溶液中浸泡5分钟3、生理盐水漂洗1次4、D－hanks液漂洗1次5、放入D－hanks液中，除去粘膜、粘膜下及浆膜如果是Shame组兔，以10ml注射器抽取约8ml D－hanks液，于粘膜层下注射起泡后，剪去粘膜层，直接剪取平滑肌组织，弃浆膜层及其上未剪下之肌组织。new: 如果是不全BOO兔，则可将膀胱剪成宽约0.5cm之条状，撕去粘膜层后，助手以一眼