大鼠滑膜细胞(A型)完全培养基

正常滑膜细胞原代培养

实验材料： 1. 实验动物：大鼠、兔，人手术切除的关节等； 2. 清洗液：不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS，添加100IU/ml青霉素、100µg/ml链霉素，pH7.2； 3. 培养液：RPMI1640培养基，补加15%小牛血清； 实验方法： 1. 将大鼠处死后，用75%酒精消毒； 2. 用手术剪剖开其四肢皮肤与肌肉，暴露长骨两端的关节，取出关节面滑膜组织置于盛有缓冲液的培养皿中； 3. 剔除滑膜组织外层结构及周边软骨组织，用缓冲液洗2—3次；

实验动物采血完全指南

最好保持在25-28℃，冬季，15-20℃为宜；⑵采血用具有采用部位一般需要进行消毒；⑶采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥；⑷若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入抗凝剂. １．取少量血 ａ．尾静脉　　 大鼠、小鼠 ｂ．耳静脉 　　兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 ｃ．眼底静脉丛 　兔、大鼠、小鼠 d．舌下静脉 　　兔 e．腹壁静脉 　　青蛙、蟾蜍 f．冠、脚蹼皮下静脉 　鸡、鸭、鹅    ２．取中量血 ａ．后肢外侧皮下小隐静脉　　　狗、猴、猫　 ｂ．

如何选用培养基

培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞，很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之，首选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养，各种目的无血清培养的首选是AIM V培养基（SFM）。在开始进行新的细胞培养时，可以参考下表所列的条件：细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM, 10% 热灭活马血清3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM, 10% 胎牛血清A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K, 10%胎牛