HybGro®CD-杂交瘤细胞无血清培养基

细胞上清液提取常见问题解析

。 4、培养细胞时，如何去除血清来源的外泌体？ 多数情况下，细胞在体外培养时需要血清，而血清中一般都含有外泌体，为避免血清对细胞外泌体的污染，可采用以下两种方法： 将细胞培养用的血清通过 1×105g 超速离心 >10 h 以去除血清外泌体； 选择无血清完全替代培养基进行细胞培养。 5、无外泌体血清（或者外泌体专用培养基）在什么时候使用？ 使用无外泌体血清培养基：细胞在正常含血清的培养基中培养一定的时间后，细胞汇合度在60% - 70% 时，移去原有含血清的培养基，换成新鲜的无外泌体血清培养基，继续

用 CD3/CD28 做好 T 细胞激活与扩增

C 孵育 20 分钟，期间进行连续搅拌，如果是在静置条件下孵育中间进行几次吹打混匀，该孵育时间可适当延长。孵育结束制备得到 CD3/CD28 Streptamer® 混合物； 2. 用培养基（成分：RPMI1640 + 10% 血清 + 50U/ml IL-2 ）调整细胞浓度至 5×10^5/ml，将步骤（1）中制备好的 CD3/CD28 Streptamer® complexes 与细胞悬液进行混合，轻轻吹匀后，将细胞加入到细胞培养板中，放置于 37°C 含 5% CO2 细胞培养箱中培养

人外周血PBMC的制备及注意事项

人外周血PBMC的制备流程 收集抗凝人外周血，用 1640 无血清培养基或 PBS 按照 1:1 的比例稀释，上下颠倒混匀或者用移液枪吹打混匀。 在 15 mL 离心管中，先加入 3 mL 充分混匀的 Ficoll 液（1.077 g/mL），再沿着管壁缓慢加入2 mL稀释后的血液，血液和 Ficoll 液分层明显为成功。 注：Ficoll 提前半小时从 4℃ 冰箱取出恢复到室温，温度过高会导致分离不明显，温度过低会导致密度过大，同样分离效果不好， 20~25℃ 最佳。。 将样本小心转移