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Praver-Thatcher法多巴胺酶显色试剂盒

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  • LM160609
  • 2026年03月29日
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      室温保存

    • 保质期

      2年

    • 英文名

      Praver-Thatcher

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      大量

    • 供应商

      上海联迈生物工程有限公司

    产品细节图片1
    Praver-Thatcher法多巴胺酶显色试剂盒实验步骤
    1.  石蜡切片置于67℃烘箱中,烘片2小时,脱蜡至水,用pH7.4PBS冲洗三次,每次3分钟(3×3’)。
    2.  取一定量pH=6.0柠檬酸盐缓冲液,加入微波盒中,微波加热至沸腾,将脱蜡水化后的组织切片置于耐高温塑料切片架上,放入已沸腾的缓冲液中,中档微波处理10分钟,取出微波盒流水自然泠却,从缓冲液中取出玻片,先用蒸馏水冲洗两次,之后用PBS冲洗2×3’。(注:不是所有的抗体都需要微波修复的,视具体情况而定)
    3.  每张切片加13%H2O2,室温下孵育10分钟,以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS冲洗3×3’。
    4.  除去PBS液,每张切片加1滴相应的第一抗体(相应稀释倍数),室温下孵育2小时。
    5.  PBS冲洗3×5’。除去PBS液,每张切片加1滴聚合物增强剂,室温下孵育20分钟。PBS冲洗3×3’。
    6.  除去PBS液,每张切片加1滴酶标抗鼠/兔聚合物,室温下孵育30分钟。PBS冲洗3×5’。
    7.  除去PBS液,每张切片加1滴新鲜配制的DAB液(二氨基联苯胺),显微镜下观察5分钟。
    8.  苏木素复染,0.1%HCl分化,自来水冲洗,蓝化,切片经梯度酒精脱水干燥,二甲苯透明,中性树胶封固,晾干后观察。
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    其他        
    一、Praver-Thatcher法多巴胺酶显色试剂盒特点
    1.  在切片加上一抗后,第二抗体标记多聚螯合物酶(HRP)的复合物与一抗结合,在多聚螯合物上有大量的HRP分子,使抗原信号有显著的放大,其敏感性较SABCSP法高。
    2.  由于多聚物在体内不存在,又不使用生物素,从而避免了由于生物素引起的非特异性背景染色,背景比SABCSP法清晰。
     

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    图标文献和实验
    相关实验
    • 免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

      。6)滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃ 20 分钟。10)PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃ 20 分钟。12)PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13)DAB 显色:DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明

    • 免疫组化实验方法

      内发生的抗原抗体反应产物,从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质,如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光、免疫酶法、免疫铁蛋白、免疫金法及放射免疫自影等。用于病理诊断的主要有免疫荧光和免疫酶法。免疫荧光是现代生物学和医学中广泛应用的方法之一,包括荧光抗体和荧光抗原技术,具有抗原抗体反应的特异性,染色技术的快速性,在细胞或组织上定位

    • (共享)免疫组化操作规程

      山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。7)滴加Ⅰ抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时(4℃过夜后在37℃复温45分钟)。8)PBS洗三次每次2分钟。9)滴加生物素化二抗,20℃~37℃20分钟。10)PBC洗3次每次2分钟。11)滴加试剂SABC,20℃~37℃20分钟。12)PBS洗4次每次5分钟。13)DAB显色:DAB显色试剂盒或者自配显色剂显色(镜下掌握显色程度)。14)蒸馏水洗。苏木素复染2分钟、盐酸酒精分化。15)脱水、透明、封片、镜检。

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