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上海一基实业有限公司
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文献和实验折叠,在细胞内形成聚集体并产生神经毒性。尽管对 HD 发病机制的理解取得了重大进展,但仍然没有有效的治疗方法。 使用病毒 AAV9-mini-cmv-spCas9, AAV9-control-gRNA-RFP,AAV9-HTT-gRNA-RFP-20Q 注射方式 脑立体定位注射,耳静脉注射 注射剂量 (1)脑立体定位注射:表达 gRNA 和 Cas9 的病毒以 1:2 的比例混合,将 30μL 的混合病毒(总共 1-1.5E+12vg)注入猪纹状体的两侧(每侧15μL),注射
在无血清细胞培养条件下将人 iPS 细胞体外分化为结肠类器官
。类器官包埋染色可用于基于抗体的鉴定。在该类器官染色方案中,我们详细介绍了通过免疫荧光共聚焦显微镜分析固定、渗透和染色包埋类器官的方法。 图1。使用抗体的类器官免疫荧光检测。使用乙酰-α-微管蛋白(A)、α-碳酸酐酶IV (B)和Sox-9 (AB5535) (C)抗体染色的人上皮肠类器官和肺类器官。 类器官染色方案 从类器官培养中移除培养基,用1X PBS (D8537)轻轻清洗2遍。 用15-20 mL 4% PFA (1.00496)在10厘米的培养皿中固定30-40个类器官ECM
系列载体DNA(或其他带有lacZ 基因载体DNA)以lacZ 缺失细胞为宿主进行转化时、或用M13噬菌体载体DNA进行转染时,如果在平板培养基中加入X–Gal和IPTG,由于β–半乳糖苷酶的α–互补性,可以根据是否呈现白色菌落(或噬菌斑)而方便地挑选出基因重组 体。 二、使用方法 : 首先把X-Gal配制成20 mg/ml的二甲基甲酰胺(DMF)溶液(-20℃避光保存),然后在100 ml的琼脂培养基中,加入200 μl的上述溶液、100 μl的IPTG(24 mg
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