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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
武汉研升生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
否
- 细胞类型:
原代细胞
- 组织来源:
膀胱组织
- 物种来源:
兔
- 细胞形态:
成纤维细胞样
- 器官来源:
膀胱组织
- 运输方式:
常温运输
- 生长状态:
贴壁
- 规格:
5×10^5cells/T25培养瓶
兔膀胱平滑肌细胞
Cat NO.: CP-Rb020
产品名称:兔膀胱平滑肌细胞
组织来源:膀胱组织
产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
细胞简介:
兔膀胱平滑肌细胞分离自膀胱组织;膀胱是主要由平滑肌细胞组成的中空器官,膀胱平滑肌的舒张和收缩使得膀胱分别储存和排出尿液。膀胱平滑肌细胞表型的调控和可诱导NO合酶的表达与多种病理状况有关,包括膀胱功能障碍。研究表明,组织缺氧抑制膀胱平滑肌细胞的增殖,膀胱平滑肌细胞的分化依赖于膀胱上皮细胞释放的因子。膀胱平滑肌细胞外基质的分泌表型可通过细胞所经历的机械变形频率而改变。平滑肌是许多疾病中的共同路径,因此,了解在疾病发生及持续过程中平滑肌怎样变化,这是治疗方法取得进展的重要一步。膀胱壁由三层组织组成,由内而外为黏膜层、肌层和外膜。其中,肌层主要由平滑肌构成。
膀胱平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。体外培养膀胱平滑肌细胞不仅为组织工程膀胱、尿道提供种植细胞的必要手段,也是研究平滑肌瘤的基础与前提。
方法简介:
普诺赛实验室分离的兔膀胱平滑肌细胞采用胰蛋白酶 - 胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
普诺赛实验室分离的兔膀胱平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:
| 培养基 | 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等 |
| 产品货号 | CM-Rb020 |
| 换液频率 | 每2-3天换液一次 |
| 生长特性 | 贴壁 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 传代特性 | 可传5代左右;3代以内状态最佳 |
| 消化液 | 0.25%胰蛋白酶 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% |
兔膀胱平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用普诺赛配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
在发货前进行质检:
1、细胞存种的活性检测。
2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检。
3、衣原体、支原体检测。
产品质量保证及售后:
1、运输过程中细胞出现污染和状态不好,免费重新发货。细胞经鉴定与承诺不符,无条件退款。
2、实验过程中若确定是客户本身问题,需支付物流和耗材费用,重新发货。其他根据情况灵活处理。
3、客户实验过程中,可提供相应技术指导。
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文献和实验较简单;但容易产生杂质如成纤维细胞等,成纤维细胞生长快,故培养之细胞质量较差;培养的大多数细胞无收缩性;且原代细胞的获得需3~4周,获得大量平滑肌细胞耗时长(17)。既往酶消化法较组织块法复杂、精细;适宜的酶浓度和培养时间的确定较为困难;然而在较短时间内可获得大量的平滑肌细胞,1996年有学者报道(Chambers(18)等)酶消化法纯度为70%。可见一种快速、高效、高纯度的酶消化法培养膀胱平滑肌的方法显得尤为重要。 本实验研究两只兔所有标本均获成功。倒置显微镜观察平滑肌细胞24小时均可见膀胱平滑肌细胞
1、麻醉后消毒,下腹正中切口于膀胱颈(结扎处远端约1~2cm),严格无菌操作取出标本、手术台位于超净台旁2、在超净台,40u/ml庆大霉素溶液中浸泡5分钟3、生理盐水漂洗1次4、D-hanks液漂洗1次5、放入D-hanks液中,除去粘膜、粘膜下及浆膜如果是Shame组兔,以10ml注射器抽取约8ml D-hanks液,于粘膜层下注射起泡后,剪去粘膜层,直接剪取平滑肌组织,弃浆膜层及其上未剪下之肌组织。new: 如果是不全BOO兔,则可将膀胱剪成宽约0.5cm之条状,撕去粘膜层后,助手以一眼
实验材料: 1. 正常大兔主动脉 2. 不含Ca2+ 和Mg2+ 的1×PBS,添加200000IU/L青霉素、200mg/L链霉素,pH7.2 3. 消化液:0.125%胰蛋白酶,0.1%胶原酶Ⅰ 4. 细胞培养瓶(T25) 5. 手术刀、解剖剪、解剖镊、眼科剪,眼科镊 6. 网筛(100目) 7. 离心管(15ml、50ml) 实验方法: 1. 处死大兔,分离出主动脉,放入预冷的含双抗的1×PBS(pH=7.2)反复清洗3次。以洗去
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