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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
充足
- 供应商:
武汉研升生物科技有限公司
- 肿瘤类型:
肺癌细胞
- 细胞类型:
肿瘤细胞
- 组织来源:
肺;源自转移部位:淋巴结
- 物种来源:
人
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 是否是肿瘤细胞:
是
- 年限:
69Y;Male
- 生长状态:
贴壁细胞
- 规格:
1×10⁶cells/T25培养瓶
| 名称 | NCI-H2087 [H2087] (人非小细胞肺腺癌细胞) (STR鉴定正确) |
| 别称 | H2087; H-2087 |
| 种属 | 人 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 上皮细胞样 |
| 冻存条件 |
冻存液:55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度:液氮 |
| 培养方案A(默认) |
生长培养基:RPMI-1640+5% FBS+1% P/S
培养条件:
气相:空气,95%;CO2,5%
温度:37℃
|
| 推荐传代比例 | 1:2-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2-3次/周 |
| 背景描述 | NCI-H2087细胞是于1988年11月从一名69岁白人男性(60年烟龄)非小细胞性肺腺癌淋巴结转移组织中分离得到的。 |
| 年龄(性别) | 男性;69岁 |
| 组织来源 | 肺;源自转移部位:淋巴结 |
| 细胞类型 | 肿瘤细胞 |
| 肿瘤类型 | 肺癌细胞 |
| 生物安全等级 | BSL-1 |
| 倍增时间 | ~52 hours |

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文献和实验据统计约 30% 细胞系被交叉污染或错误辨识,因使用了交叉污染或错误辨识的细胞而导致研究结论错误、结果不可重复、临床细胞治疗灾难性后果……,这浪费大量时间、精力和金钱。Everything was going along fine until they discovered their HeLa cell line expressed Y chromosome markers因此近年 NIH、ATCC、Nature 和 Science 等对此多次发出呼吁,要求研究者对细胞进行鉴定。STR 基因
都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。注意: 1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
基因组 DNA 为模板进行 PCR 扩增,电泳确认 PCR 产物大小,对大小正确的产物进行测序,如测序结果与理论序列一致,则确认该基因编辑小鼠模型为正确重组模型。 TIPS 双臂 PCR 产物需测通:我们在实践中发现,即使 Donor 序列完全正确,部分鼠会存在突变或片段缺失的情况,我们推测是细胞在 Donor 重组前或过程中对 Donor 发生了编辑或重组后结构不稳定等原因所致,所以只对 Donor 各个部分接头测序是不严谨的,建议测通。 下面以 CKO 模型鉴定为例说明双臂 PCR 鉴定
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