FITC-Phytohemagglutinin-L (PHA

产品描述

植物血凝素（Phytohemagglutinin，PHA），多指来源于Phaseolus Vulgaris菜豆属（红腰豆）的凝集素，是由4个亚基通过非共价键结合形成的四聚体糖蛋白，包含两种亚基分子，L亚基（白细胞凝集素）和E（红细胞凝集素），L亚基具有白细胞凝集和高促有丝分裂活性，E亚基具有高红细胞凝集和低促有丝分裂活性。因此，这两种亚基的组合可产生五种异构体（L4, L3E1, L2E2, L1E3和E4）。

顾名思义，PHA-L（Phytohemagglutinin-L），是4个L亚基通过非共价键连接形成的四聚体，经色谱纯化所得。PHA-L是白细胞凝集素，具有高促有丝分裂和白细胞凝集活性，无红细胞凝集活性。广泛用于免疫学研究，比如用作PBMC的刺激物；用作INF-γ ICS、ELISPOT实验的阳性对照；或用作顺行性神经示踪剂。

本品是FITC标记的PHA-L（FITC labeledPhytohemagglutinin-L, FITC-PHA-L），Ex/Em=495/515nm，亲和纯化所得，基本不含未标记的荧光素。建议工作浓度范围是5-20μg/ml。

产品特性

英文同义名：FITC labeledPhytohemagglutinin-L, from Phaseolus Vulgaris;FITC labeled Phaseolus Vulgaris Leucoagglutinin;PHA-L (FITC);

中文同义名：FITC标记的植物血球凝集素-L，来源于菜豆；FITC标记的白细胞凝集素（PHA-L）；

糖类特异性：半乳糖或复合物结构

F/P（摩尔）：3.0-5.0

外观：溶液（溶于10 mM HEPES, 0.15 M NaCl, pH 7.5, containing 0.1 mM Ca2+, 0.08% sodium azide）

蛋白浓度：2mg/ml

Ex/Em：495/515nm

应用：IF、糖生物学

保存与运输方法

保存：2-8℃避光保存，至少1年有效。 

运输：冰袋运输。

应用示例

文献来源：Winston Y. Lee et al. The Role of cis Dimerization of Signal Regulatory Protein α (SIRPα) in Binding to CD47. J Biol Chem. 2010 Dec 3; 285(49): 37953–37963. PMID: 20826801

【实验应用】：使用PHA-L-FITC评估N-连接糖基化的减少程度。

【实验方法】：为了抑制N-连接聚糖的生成，长满的CHO细胞用含衣霉素（Tunicamycin，5 μg/ml）的新鲜培养基处理18h。为了停滞N-连接聚糖的成熟，未长满的CHO细胞用含几夫碱（Kifunensine，10 μg/ml）的新鲜培养基处理，直至细胞长满后，用PHA-L-FITC进行交联分析和流式分析来评估N-连接糖基化的减少程度。

文献来源：Kristyna Skrenkova et al. N-Glycosylation Regulates the Trafficking and Surface Mobility of GluN3A-Containing NMDA Receptors. Front Mol Neurosci. 2018; 11: 188.

【实验应用】：使用PHA-L-TRITC和Rhodamine-Con A评估N-连接糖基化的抑制是否会影响含GluN3A的N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDARs）的表面递送。

【实验方法】：COS-7细胞用含或不含抑制剂孵育2天，包括衣霉素（1 μg/ml），DNJ（200 μg/ml, α-葡萄糖苷酶I-II抑制剂），几夫碱（5 μg/ml, ER α-甘露糖苷酶I抑制剂）, DMM（200 μg/ml, ER α-甘露糖苷酶I-II抑制剂）, 苦马豆素（100 μg/ml，GA α-甘露糖苷酶II抑制剂）。用溶于封闭液的罗丹明标记的刀豆蛋白和PHA-L（20 μg/ml）孵育5min。之后细胞清洗，用4% PFA固定20min，之后用抗荧光淬灭剂封片。

注意事项

1. 本品为荧光标记的PHA-L，不适合用于顺行神经追踪研究。若要进行本研究，请选择未标记的PHA-L。
2. 我司还提供罗丹明标记的PHA-L，Ex/Em=550/575nm，呈红色荧光。
3. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。