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DiIC18(5)-DS 细胞膜橙红色荧光探针

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  • 上海经科
  • JK4781
  • 2026年05月17日
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    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 英文名

      DiIC18(5)-DS

    • 供应商

      上海经科化学科技有限公司

    • 规格

      5mg

    产品细节图片1

    产品描述:

    DiIC18(5)-DS是红色荧光和亲脂性碳菁类染料-DiD(DiIC18(5))的类似物,英文全名:1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′- Tetramethylindodicarbocyanine-5,5′-Disulfonic Acid,包含磺酸基团以改进探针的水溶性。在水中呈弱荧光,插入膜内则呈强荧光且相当稳定。在脂质环境内具极其高的摩尔吸光系数和短的激发态寿命(~1ns)。一旦进入细胞后,在细胞内质膜中逐步扩散,于最佳浓度条件下可将整个细胞均匀染色。

    基本特性:

    同义名:1,1′-Dioctadecyl-3,3,3′,3′- Tetramethylindodicarbocyanine-5,5′-Disulfonic Acid细胞膜红色荧光探针
    CAS NO.:N/A

    分子式:C61H98N2O6S2

    推荐滤光器:Omega-XF47, Chroma-31023 分子量:1019.57g/mol

    外观:红色至暗红色,紫色至深紫色粉末

    纯度:≥95%(HPLC)

    Ex/Em:650/670 nm

    溶解性:溶于DMSO

     

     保存与运输方法

    保存:-20ºC干燥避光保存,有效期至少一年。

    运输:室温运输。

    注意事项

    1)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

    2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用方法

    【注意】以下使用方法仅用作参考,可根据具体的实验条件做出调整。

    1. 染色液制备

    1)储存液制备:用DMSO配置浓度1~5 mM的储存液。例如,取5mgDiIC18(3)-DS(Mw:993.53g/mol)溶于1ml无水DMSO中,充分溶解,即得到5mM的储存液。【注意】未使用的储存液根据单次用量分装储存在-20℃,避免反复冻融。

    2)工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,调整到1~5 μM的工作浓度。【注意】工作液最终浓度需要根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度开始,以10倍范围为区间进行较优浓度的摸索。

    2.悬浮细胞染色

    1)加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。

    2)37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。

    3)孵育结束,按1000~1500 rpm离心5min。

    4)去除上清液,之后轻柔加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。

    5)再重复3),4)步骤两次。

    3.贴壁细胞染色

    1)将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。

    2)从培养基中移走盖玻片,滤掉过量培养液,将盖玻片放在潮湿的小室内。

    3)在盖玻片的一角加入100μL的染色工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。

    4)37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞最佳培养时间不同。可以20min作为起始孵育时间,之后优化以保证得到均一化的标记结果。

    5)吸掉染色工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,孵育5~10min,然后吸走培养基。

    4.显微镜检测

    1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见下表:

    货号 荧光探针 最大激发/最大发射波长

     

    (Ex/Em)

    滤光片编号
    Omega公司 Chroma公司
    MX4002, MX4036 DiI, DiIC18(3)-DS 549/565 nm, 555/570 nmnm XF108, XF32 41002, 31002
    MX4001 DiO 484/501nm XF100,XF2341001, 31001 41001, 31001
    MX4004, MX4037 DiD, DiIC18(5)-DS 644/663nm, 650/670nm XF110, XF47 41008, 31023
    MX4005 DiR 748/780nm XF112 41009

    2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:

    a) DiI和DiO=Omega XF52,Chroma 51004;

    b) DiI和DiD=Omega XF92,Chroma 51007;

    c) DiI,DiO和DiD=Omega XF93,Chroma 61005;

    5.流式细胞仪检测

    经DiO,DiI,DiD和DiR染色的细胞分别用流式细胞仪的FL1,FL2,FL3或FL4通道检测。

    注意事项

    1)经碳菁类染料(比如DiR)染色后的细胞能用多聚甲全(PFA)固定,但不能用甲醇或其他溶剂的固定剂。染色能承受0.1% Triton X-100或0.1%毛地黄皂苷的透化处理,但会明显增强胞内染色。

    2)经碳菁类染料(比如DiR)染色后的细胞不建议使用封片剂,因封片剂内的甘油或有机溶剂会溶解染料,引起增加的胞内染色和随时间增加的高背景。建议直接在PBS或其他生理缓冲液内成像。使用PBS直接盖上盖玻片,然后四周用指甲油密封。

    3)荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。

    4)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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    图标文献和实验
    该产品被引用文献

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