C6/36完全培养基

检测细胞增殖，你的方法用对了吗？

液：用 DMSO 配置终浓度为 5 mM 的 CFSE 溶液（1000×）RPMI 1640 完全培养基：RPMI 1640 培养基 + 10% 血清 + 1% 双抗☟☟☟— 实验正式开始 —1. 脾淋巴细胞的制备无菌操作取出小鼠脾脏，研磨成单细胞悬液，用红细胞裂解液或者小鼠淋巴细胞分离液去除红细胞，将细胞过 40 μm 细胞滤网后，进行细胞计数。样本清洗液洗涤（可用 PBS 或者不含血清双抗的培养基代替），1 500 rpm 离心 5 min，用 PBS 重悬，调整细胞浓度为 107/ml。2. CFSE

外泌体专用培养基 VS 去外泌体血清，谁赢了？

体，后续培养后收集的细胞上清中的外泌体不确定是从细胞分泌的还是血清中来的，影响结果的准确性。   2. 营养：细胞培养是需要一定的营养的，那么如果不加血清，单独只用基础培养基，就会导致细胞处于饥饿状态，严重影响细胞生长，甚至出现吞噬外泌体的现象，影响实验结果。   3. 杂蛋白：去外泌体胎牛血清可以很好地解决 1、2 中涉及的问题，但还会存在杂蛋白影响蛋白定量结果，导致数据偏高，影响后续实验的准确性。如果使用外泌体专用无血清培养基（专门针对外泌体获取的培养基，化学成分明确，类似于完全培养基的一种

相对定量，你的内参选对了吗？

了解一下。 实验目的：测定肝癌细胞 X 基因相对于正常肝细胞的表达量。通过荧光定量检测可得：肝癌细胞中 X 基因的 CT= 25，正常肝细胞中 X 基因的 CT= 26，所以，利用表达量倍数计算公式 2-△CT计算，发现肝癌细胞中的 X 基因表达量是正常肝细胞表达量的 2 倍。 但是，上面这个定量结果检测有效的前提是：必须保证两盘细胞的细胞数量完全一致；RNA 提取、逆转录以及定量效率及操作必须完全一致；不存在操作误差等。这显然是无法达到的。 那如何才能使这些误差不影响 X 基因