- ￥60 - 3500
- 经科
- JK5429
- 国产
- 2026年03月23日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
现货
- 英文名：
2×HotStart Genotyping PCR Master Mix (With Dye)
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海经科化学科技有限公司
- 保存条件：
-20℃
- 规格：
1mL/5×1mL/50×1mL/100×1mL
| 规格： | 1mL | 产品价格： | ￥60.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 5×1mL | 产品价格： | ￥250.0 |
| 规格： | 50×1mL | 产品价格： | ￥2000.0 |
| 规格： | 100×1mL | 产品价格： | ￥3500.0 |
产品简介
本品是即用型的PCR预混合溶液，含有HotStart Taq DNA Polymerase，dNTP以及优化的缓冲体系，只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化了实验的操作步骤，可以高通量操作并提高实验结果的重现性。HotStart Taq DNA Polymerase是经过配体修饰的热稳定Taq DNA Polymerase，该配体可以随温度变化来调节DNA聚合酶活性。在室温下酶活性被完全封闭，经95°C加热后活性才被释放。Arcegen™ HotStart DNA Polymerase的激活时间只需要2-3 min，兼容现有的PCR程序。本产品防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增，可以有效地进行基因分型实验。
产品储存
-25~-15℃储存，有效期2年。干冰运输。
产品应用
本产品主要应用于小鼠基因型鉴定。
操作注意
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
本产品仅作科研用途！
质量控制
核酸外切酶残留检测：20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII，37°C下孵育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测：20 μL本品和1 μg λDNA，37°C温育4 h，DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测：50 μL体系中，加入25 μL本品，以无菌ddH2O为模板，扩增E.coil 16s rDNA基因。30个循环后扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳，EB染色，无扩增条带。
操作说明
1. 推荐PCR反应体系
表1 PCR反应体系
|
组分 |
体积（μL） |
终浓度 |
|
2×HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye) |
25 |
1× |
|
模板 |
x |
- |
|
正向引物F（10 μM） |
2 |
0.4 μM |
|
反向引物R（10 μM） |
2 |
0.4 μM |
|
ddH2O |
Up to 50 |
- |
不同模板的推荐使用量：
表2 不同模板的推荐使用量
|
模板种类 |
使用量范围（50 μL反应体系） |
|
基因组DNA |
50–100 ng |
|
质粒DNA |
0.1-20 ng |
|
cDNA |
1-5 μL (不超过反应体系的1/10) |
2. 反应程序
表3 PCR反应程序
|
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
|
预变性 |
95℃ |
5 min |
1 |
|
变性 |
95℃ |
30 sec |
35 |
|
退火* |
50-60℃ |
30 sec |
|
|
延伸** |
72℃ |
30 sec/kb |
|
|
终延伸 |
72℃ |
10 min |
1 |
【注】：
*推荐退火温度和时间：退火温度推荐使用50-60℃。退火时间推荐设置为30 sec，可以在20-30 sec内调节。可根据需要，设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。
**延伸温度和时间：温度推荐使用72℃。时间推荐使用30-60 sec/kb。
扩增产物：请将PCR扩增产物放置于-20℃保存，防止DNA发生降解。
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文献和实验本产品防止了在样品准备及反应升温阶段产生非特异扩增，可以有效地进行基因分型实验。
Ahr knockout genotyping by PCR
pipettes, pipette tips, gloves, tube for master mix, water, and PCR tubes Make the master mix on ice and aliquot 99 ul to tubes on ice Add 100 ng of template to the PCR tubes and add to a pre-heated block This should be a 100 ul reaction Cycle
Ahr transgenic genotyping by PCR
. Run 10 ul from each PCR reaction out on a 1% agarose gel. Master Mix: 5 ul 10xPCR buffer (with MgCl2, 1.5 mM final) 4 ul dNTP mix (2.5 mM each) 1 ul OL638 (20 uM) 1 ul OL639 (20 uM) 0.5 ul Taq 34.5 ul distilled, deionized
ARNT transgenic genotyping by PCR
tail DNA Typically you will be genotyping several animals at once, so make a master mix of everything but the DNA. Aliquot 46 ul to tube and add 4 ul of DNA. Set the reactions up on ice, and immediately put them into the thermalcyler
技术资料
