TCEP Hydrochloride 三(2-羧乙基)膦盐酸

TECP-HCl基本描述：

TCEP Hydrochloride（TECP-HCl），英文名Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride，中文名三(2-羧乙基)膦盐酸盐，CAS：51805-45-9，一种不含硫醇且无臭的强还原剂，广泛用作各种多肽和蛋白中的二硫键还原。水溶性强，在碱性和酸性溶液中都能稳定保存。还可用作许多重金属离子如Zn(II)、Cd(II)、Pb(II)和Ni(II)的螯合剂。

TECP-HCl的优势（与BME,DTT相比较）：

与其他的还原剂如DTT，β-ME（BME）相比，TECP-HCl具有许多优点：

1. 无臭：不像DTT或BME，无异味，可在工作台上进行蛋白或多肽还原实验，创造更健康的实验环境；

2. 强特异性：宽广pH范围内，选择性的，完全且均匀的还原最稳定的水溶性二硫键；

3. 使用简便：于室温，pH 5的条件下＜5min即可有效还原；

4. 稳定性高：TECP-HCl自身结构的内在稳定性和对空气氧化的抵抗性，使得处理和保存的过程中不需做任何预防措施。与蛋白中的其他官能团不会发生反应。

5. 效率高：对于大部分应用，5-50mM TECP-HCl于室温条件作用几分钟，即可提供充足的摩尔力来还原二硫键。

6. 兼容性广：因不含硫醇，在执行许多马来酰亚胺标记或交联试剂的反应前勿需提前去除TECP-HCl。大多数条件下，＜10-20mM TECP-HCl兼容于马来酰亚胺化学反应。

使用TECP-HCl的考虑事项【何时用，何时不用？？】：

1. TCEP-HCl易溶于几乎所有pH的水溶性缓冲液；这一特性允许实验前开始准备工作液和10×储存液。

2. TCEP-HCl在磷酸盐缓冲液不是很稳定，特别在中性或碱性pH。因此，若必须使用溶于PBS的TCEP，建议使用前才开始配制工作液。

3. TCEP-HCl可能用作DTT和BME的替代物，用于SDS-PAGE实验用的样品上样缓冲液；使用终浓度为50mM。

4. 由于TCEP-HCl在溶液中带正电荷，因此不能与等电点聚焦应用兼容。

基本特性：

1. CAS NO：51805-45-9

2. 英文同义名：TCEP-HCl; Tris (2-Carboxyethyl) phosphine Hydrochloride;

3. 中文同义名：三(2-羰基乙基)磷盐酸盐；三(2-羧乙基)膦盐酸盐；

4. 分子式：C9H15O6P · HCl

5. 分子量：286.65g/mol

6. 外观：白色晶体

7. 纯度：≥99%

8. 熔点：176-186℃

9. 溶解性：溶于水（50mg/ml）

 

保存与运输方法

保存：2-8ºC干燥保存，至少1年有效。

运输：冰袋运输。

储存液制备

1. 称取5.73gTCEP-HCl（Mw：286.65g/mol），加35ml分子生物学级别的冰水，使其充分溶解混匀，此时得到的溶液酸性强，pH约为2.5。

2. 用10N NaOH或10N KOH调整pH到7.0。

3. 用冰水定容至40ml，即得到0.5M TCEP储存液。按1ml/管分装后，置于-20°C冻存。