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- 2026年03月19日
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文献和实验）、美国谷物化学协会（AACC）等及不少国家都把凯氏定氮法定为标准法。通过本实验学习凯氏定氮法的原理，掌握样品的处理和自动凯氏定氮仪的操作。 二、原理 根据蛋白质的含氮量比较恒定，平均约为16% ，通过测定样品的含氮量进而推算蛋白质的含量。种子中的氮化物可分为蛋白氮和非蛋白氮。用三氯乙酸溶出种子粉或脱脂种子粉中的非蛋白氮化物（氨基酸、酞胺和无机氮），沉淀样品中的蛋白质并使二者分离。在催化剂参与下，用浓硫酸消煮分解样品，使蛋白氮转化为氨态氮，并与硫酸结合生成硫酸按。加碱蒸馏，使氨释放
6.25（100／16＝6.25），算出蛋白质的含量。若以总氮含量乘以6.25，就是样品的粗蛋白含量。试样中若含有硝态氮时，首先要使硝态氮还原为铵态氮，可加入水杨酸和硫代硫酸钠，使硝态氮与水杨酸在室温下作用生成硝基水杨酸，再用硫代硫酸钠粉使硝基水杨酸转化为铵盐。由于水杨酸与硫代硫酸钠会消耗一部分硫酸，所以消化时的硫酸用量要酌情增加。二、材料、仪器设备及试剂 （一）材料：各种干燥、过筛（60～80目）的植物样品（二）仪器设备：1. 消化管；2. 微量凯氏定氮蒸馏装置一套；3. 三角烧瓶；4.微量
入三氯乙酸，使其最终浓度为5％，将蛋白质沉淀出来，分别测定总氮、蛋白氮或非蛋白氮；通常只测定总氮或蛋白氮。将植物材料与浓硫酸共热，硫酸分解为二氧化硫、水和原子态氧，并将有机物氧化分解成二氧化碳和水；而其中的氮转变成氨，并进一步生成硫酸铵。为了加速有机物质的分解，在消化时通常加入多种催化剂，如硫酸铜、硫酸钾和硒粉等。消化完成后，加入过量NaOH，将NH4+转变成NH3，通过蒸馏把NH3导入过量的硼酸溶液中，再用标准盐酸滴定，直到硼酸溶液恢复原来的氢离子浓度。滴定消耗的标准盐酸摩尔数即为NH3的摩尔
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