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- axdbio
- 上海
- AXDC359
- 2026年03月31日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
NCI-H1944
- 库存：
100万细胞数
- 供应商：
上海安序达生物科技有限公司
- 肿瘤类型：
详见说明
- 细胞类型：
科研
- 组织来源：
器官
- 物种来源：
人或动物
- 细胞形态：
正常
- 是否是肿瘤细胞：
详见说明
- 器官来源：
详见说明
- 运输方式：
顺丰运输
- 年限：
数年
- 生长状态：
贴壁生长
- 规格：
25T
请收到细胞后，先在培养箱静置3-5小时后，再在倒置镜下(好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 （一）如果细胞生长愈合度低于70%且细胞未大面积脱落，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出旧培养液，换8-10ml新鲜培养液后继续培养。（二）如果细胞大面积脱落，将细胞继续静置过夜，期间可不进行处理。等待第二天观察细胞，如果细胞大部分恢复贴壁，可参照（一或三处理）；如果细胞少部分贴壁，仍然大部分细胞漂浮，可将细胞悬液通过离心收集，用新鲜完全培养基重新接种至新的培养瓶中，旧培养瓶中的细胞更换新的完全培养基继续培养。
如果细胞愈合度已经超过75%，即可进行传代培养。具体步骤如下： 1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。 2. 加0.7ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）（依据细胞消化难易程度可适当增减）于培养瓶中，后轻轻摇晃让消化液充分接触细胞，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，期间间隔5-10s用力拍打瓶壁两侧，等细胞大部分（大于50%）能拍打下来时，可将培养瓶转移至无菌生物安全柜中。 3. 轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中，按6-8ml/瓶补加完全培养基。如果没有特别说明，收到细胞后的次传代一般是一传二。
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文献和实验littleyan0418 我现在的任务是要构建人肺癌细胞的cDNA文库，但我不是这个方面科班出身，好多地方还不是很明白，想请教师兄师姐的经验，应该注意些什么。现在对总RNA的提取我有点找不出头绪。麻烦师兄师姐们可以给我分享些这方面的资料和网址吗？非常感谢！！ neuronboy http://www.takara.com.cn/ 价格、试剂盒和说明书都有。呵呵 littleyan0418
我培养过不少肺癌细胞（人类），其中绝大部分都是贴壁细胞，具体如： （１） Ａ５４９（肺腺癌） （２） ＮＣＩＨ４４６（小肺细胞癌） （３） ８０１（非小肺细胞癌） （４） ＮＣＩＨ４６０ （大细胞肺癌） 在消化传代过程中，步骤基本一致： 吸去旧的培养液－＞用Ｈａｎｋｓ＇（１Ｘ）清洗一两次－＞加入一定量的消化液（Ｔｒｐｓｉｎ－ＥＤＴＡ）－＞置显微镜下观察，待细胞大部分变圆时，回到超静台－＞吸去消化液－＞加入一定量的新培养液－＞反复吹打细胞－＞再置显微镜下观察，直到细胞全部悬浮起来－＞
所需的D-HANK'S液和胰酶和用1640配置的适当浓度小牛血清最好都放在37度预热十分钟左右，让它们和细胞生长环境的温度是一样的。这样能达到既对细胞没有外来刺激的作用又能达到反应的最佳条件。我用的是小培养瓶，方法是:先把旧的培养液倒掉，用D-HANK'S大约3ml洗一次，加浓度为0.1%的胰酶进行消化，添加量只要能均匀的覆盖培养瓶底，大约要1.5ml，最好把瓶盖旋紧放到37度培养箱里培养3-5分钟，在显微镜下观察细胞收缩，变圆，加入3ml的10%的血清终止消化。小心仔细的吹打培养瓶底使细胞
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