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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海联祖
- 库存:
28
- 英文名:
NCI-H1944
- 生长状态:
贴壁生长
- 器官来源:
女 肺;分离自转移灶:软组织
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
上皮细胞样
- 规格:
T25培养瓶
| 产品名称 | 规格 | 货号 |
| NCI-H1944细胞 | T25瓶 | LZ-X968931 |
来源:女 肺;分离自转移灶:软组织
形态:上皮细胞样 贴壁生长
含量:>1x10^6 细胞数
规格:T25瓶
用途:仅供科研使用。
干冰运输及复苏好存活细胞
(1)1mL冻存管包装干冰运输,收到后-80度冰箱保存过夜后转入液氮或直接复苏,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。
(2)T25瓶复苏的存活细胞常温发货,收到后按照细胞接收后的处理方法操作。
1) 收到细胞后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
2)请在4或5X显微镜下确认细胞状态,同时给刚收到的细胞拍照(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为售后时收到时细胞状态的依据。
3) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。
4)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。 收到细胞后第一次传代建议T25培养瓶1:2传代 。 一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。备注:该细胞为悬浮并部分聚团生长
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。
二. 细胞处理:
1) 冻存细胞的复苏:
将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入到含4-6mL完全培养基的离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心3-5min,弃去上清液,完全培养基重悬细胞。然后将细胞悬液加入含6-8ml完全培养基的培养瓶(或皿)中37℃培养过夜。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
悬浮状态下生长的细胞,可以通过向培养瓶中添加完全培养基来维持细胞的生长状态,一般情况下细胞密度维持在1×105~1×10^6个/mL(不同细胞对密度要求不同,)可以维持细胞的正常生长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管中1000rpm,离心5min,弃去上清,补加1-2mL培养液后重悬混匀后将细胞悬液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照说明书要求配置的新的完全培养基以保持细胞的生长活力,后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。
3) 细胞冻存: 收到细胞后建议在培养前3代时冻存一批细胞种子以备后续实验使用。
下面T25瓶为例;
1. 细胞冻存时按照细胞传代的过程收集消化好的细胞到离心管中,可使用血球计数板计数,来决定细胞的冻存密度。一般细胞的推荐冻存密度为1×10^6~1×107个活细胞/ml.
2. 1000rpm离心3-5min,去掉上清。用配制好的细胞冻存液重悬细胞 ,按每1ml冻存液含1×10^6~1×107个活细胞/ml分配到一个冻存管中将细胞分配到冻存管中,标注好名称、代数、日期等信息。
3. 将要冻存的细胞置于程序降温盒中,-80度冰箱中过夜,之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
| 恒河猴胚肾细胞;FRhK-4 [FRhK4] | β乳球蛋白 βLactoglobulin from bovine milk,≥90% 90232 50MG 通用试剂 |
| 人脐静脉血管内皮细胞 英文名称: HUVEC | 胰凝乳蛋白酶(牛)1克2~8℃,避光 |
| RKO-E6 人结肠癌转基因细胞 | 木霉 英文名; Trichoderma sp. 规格; 冻干粉 赭绿青霉 Penicillium ochrochloron 冻干粉 28℃;5-7天;好氧; 球毛壳 Chaetomium globosum 模式菌株 no 28℃;3-5天;好氧; |
| Ca Ski(人上皮细胞) 5×106cells/瓶×2 | 4Bromoacetyl3fluoropxenylboronic acid 25364 |
| 人前脂肪细胞培养试剂盒 人前脂肪细胞培养试剂盒 试剂盒 | 改良麦康凯肉汤冻干配套试剂SR0240支添加于(025(025 |
| TE671 subline No.2(人横纹肌肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 | D组酸shēng huà shì jì容量:RT100克 |
| EC9706 食管癌 | 可溶性焦0酸铁0.025/支*5每支添加于HB8493或HB8493-1中 |
| 小鼠Ⅲ型胶原(COL3)ELISA试剂盒 ,英文名: COL3 ELISA Kit | 肠道沙门氏菌亚种甲型副血清型 英文名; Salmonella enterica subsp.‖enterica 规格; 冻干粉 茂原链霉菌 Streptomyces mobaraensis 冻干粉 28℃,3-5天,好氧 阿维菌素链霉菌 Streptomyces avermitilis 模式菌株 no 28℃,3-5天,好氧 |
| 人膀胱癌细胞 英文名称: 5637 | 次亚嶙酸,英文名或英文缩写:Ammonium hypophosphite,级别:AR,99%,规格:1公斤 |
| HCC827(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 | 2 2Iodoaniline,≥98.0% 6430 5G 通用试剂 |
| 小鼠B因子(BF)ELISA试剂盒 ,英文名: BF ELISA Kit | 3氧基炳安 3Mqthoxypropylcminq 2330 |
| 大鼠成年表皮角质形成层细胞培养试剂盒 大鼠成年表皮角质形成层细胞培养试剂盒 试剂盒 | 1,2,4,5四苯 1,2,4,5Tetrabromobenzene,97% 636 10G 表面活性剂 |
| NCI-H1944细胞HFL-I 人胚肺成纤维细胞 | D-环丝酸 0.1g/支*2 加入250ml TSC琼脂基础中 |
| 人髓系细胞触发受体-1(EM-1)ELISA检测试剂盒HumaniggeringReceptorExpressesonMyeloidCells-1,EM-1ELISAKit 96T/48T | 4安基本并脒二言醋(+4℃) Nc |
| 脑微血管内皮细胞 1×106 5×106 | Kovacs氏靛基质试剂盒 10ml*1 吲哚(靛基质)试验配套试剂 incubation media Kovacs氏靛基质试剂盒 10ml*1 吲哚(靛基质)试验配套试剂 |
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文献和实验都是贴壁细胞,在消化传代过程中,步骤如下:倒尽旧的培养液->用无血清的培养基清洗一两次->加入一定量的胰酶,置于37度培养箱中5--10分钟,使细胞悬浮->显微镜下观察,待细胞大部分变圆时,回到超静台->加入一定量的含血清的新培养液,以终止胰酶作用->反复吹打细胞->再置显微镜下观察,直到细胞全部悬浮起来->吸出一部分加入新的培养瓶中->最后再补充加入一定量新的培养液。注意: 1、吹细胞时尽量多吹边角儿,此处细胞生长的多。2、吸出细胞前要混匀,可以剧烈震荡培养瓶。3、我们用的是DMEM
方法1、培养液中按1%的体积加双抗(含青霉素1万U/ml,链霉素0.01g/ml)及肝素液(含肝素100U/ml)。用3.5%NaHCO3液调pH值为7.2~7.4,然后加灭活的小牛血清,使浓度为20%。再加PHA(50U~75U/ml),无菌分装于培养瓶内,每瓶1ml。2、无菌操作采血,并以肝素抗凝,同时进行白细胞计数及分类计数。3、取0.1ml抗凝血,加入到含1ml培养液的培养瓶中,每个血样接2~3个培养瓶。如果以血浆或分离的淋巴细胞代替全血,加入培养瓶中更好。4、37℃培养72h,在培养结束前16h
一、实验材料NCI-H1299,购自上海晶莱生物技术有限公司。表 2.1.1 主要试剂试剂与耗材厂家(货号)细胞培养瓶FALCON 中国(353014)Penicillin/streptomycin solution(KGY002)0.25% Tripsin-EDTA(BK-E3076)PBS(BK330-2)胎牛血清GIBCO 美国(10270-106)1640 培养基Hyclone 美国(SH3080901)Annexin V-FITC/PI 凋亡试剂盒 二、实验仪器表 2.2.1 主要
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