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- axdbio
- 上海
- AXDC599-L/G
- 2026年04月17日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
CT26WT-LUC/GFP
- 库存：
100万细胞数
- 供应商：
上海安序达生物科技有限公司
- 细胞类型：
科研
- 组织来源：
器官
- 物种来源：
人或动物
- 细胞形态：
正常
- 器官来源：
详见说明
- 运输方式：
顺丰运输
- 年限：
数年
- 生长状态：
贴壁
- 规格：
25T
请收到细胞后，先在培养箱静置3-5小时后，再在倒置镜下(好是在4X物镜)观察整个细胞生长情况。 （一）如果细胞生长愈合度低于70%且细胞未大面积脱落，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出旧培养液，换8-10ml新鲜培养液后继续培养。（二）如果细胞大面积脱落，将细胞继续静置过夜，期间可不进行处理。等待第二天观察细胞，如果细胞大部分恢复贴壁，可参照（一或三处理）；如果细胞少部分贴壁，仍然大部分细胞漂浮，可将细胞悬液通过离心收集，用新鲜完全培养基重新接种至新的培养瓶中，旧培养瓶中的细胞更换新的完全培养基继续培养。
如果细胞愈合度已经超过75%，即可进行传代培养。具体步骤如下： 1. 弃去培养液，用PBS（不含钙,镁离子）洗1-2次。 2. 加0.7ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）（依据细胞消化难易程度可适当增减）于培养瓶中，后轻轻摇晃让消化液充分接触细胞，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，期间间隔5-10s用力拍打瓶壁两侧，等细胞大部分（大于50%）能拍打下来时，可将培养瓶转移至无菌生物安全柜中。 3. 轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中，按6-8ml/瓶补加完全培养基。如果没有特别说明，收到细胞后的次传代一般是一传二。
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文献和实验抗大鼠波形蛋白单克隆抗体，l：200稀释度)，4℃过夜或37℃孵育30分钟，BS漂洗3次，每次5分钟； (7)滴加与第一抗体种属匹配的荧光素标记二抗(如羊抗小鼠FITC-IgG。1：100)，37℃避光孵育30分钟，PBS漂洗3次，每次5分钟； (8)Hoechst 333442复染细胞核15～20分钟(不是必需步骤)； (9)甘油磷酸缓冲液封片，荧光显微镜下镜观察； (10)结果分析：波形蛋白免疫反应阳性细胞胞质呈现绿色荧光，如细胞核复染后可呈现亮蓝色荧光。阴性细胞仅见细胞
的时间，所以适用于高通量的筛选。BL/CL双功能分子目前已有报道，一个双功能的分子既可以作为萤火虫荧光素酶的底物，又可以作为HRP的底物。通过这种方法，因为不同的发光光谱，就可在同一个反应孔中可以用两个酶标记并独立测试。通过编码BL酶的基因或发光蛋白基因与第二个基因（编码结合蛋白，如蛋白A，蛋白G，链霉亲和素，或生物素受体肽）形成融合蛋白可以广泛用于免疫分析或免疫印迹。细菌磁性颗粒（Bacterial Magnetic Particles，BMPs）一个新的有趣的方法是基于磁性细菌
。标记细胞的方法基本上是通过分子生物学克隆技术，将荧光素酶的基因插到预期观察的细胞的染色体内，通过单克隆细胞技术的筛选，培养出能稳定表达荧光素酶的细胞株。目前，常用的细胞株基本上都已标记好，市场上已有销售。将标记好的细胞注入小鼠体内后，观测前需要注射荧光素酶的底物—荧光素，为约280道尔顿的小分子。荧光素脂溶性非常好，很容易透过血脑屏障。注射一次荧光素能保持小鼠体内荧光素酶标记的细胞发光30～45分钟。每次荧光素酶催化反应只产生一个光子，这是肉眼无法观察到的，精诺真公司（Xenogen Corp
