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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
20
- 供应商:
上海彩佑生物
- 细胞形态:
上皮/成纤维等
- 运输方式:
干冰/常温
- 年限:
长期
- 生长状态:
贴壁/悬浮
- 规格:
T25瓶
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松)
原代角质细胞如图:

PROL1 过表达前列腺癌细胞系 (LNCaP-PROL1+)培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
原代小鼠心脏微血管内皮细胞如图:

PROL1 过表达前列腺癌细胞系 (LNCaP-PROL1+)售后服务告知书
1)细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2. 细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;
5. 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;
6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。
二)细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
1. 客户造成细胞污染,不重发;
2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4. 细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
5. 细胞培养时经其它处理的,不重发;
6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;
7. 视具体情况而定。
更多细胞产品或其培养基可以联系我们:PROL1 过表达前列腺癌细胞系 (LNCaP-PROL1+)
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文献和实验miR-370的高表达通过下调转录因子FOXO1的表达诱导前列腺癌细胞增殖
,它作为一种肿瘤抑制因子与各种关键的细胞功能有关,包括细胞生长、细胞的分化、细胞凋亡以及血管生成。所以,令人迷惑的是FOXO蛋白为何在肿瘤细胞中低表达。microRNA是一种非编码的含有20~22个核苷酸的单链RNA,它可以使靶基因的转录受到抑制,沉默或降解靶基因,对调控基因的表达起到极大的作用。最近的研究发现,在5种前列腺癌细胞系中miR-370比正常的前列腺上皮细胞显著高表达。miR-370的异常表达诱导前列腺癌细胞DU145和LNCaP的增殖,并促进细胞的非依赖型锚定增长和细胞克隆的形成;相反抑制
一、材料 1. Resazurin细胞活力检测试剂盒(Biotium,Inc.30025) 2. 细胞:在本试验中,使用了三种人类前列腺癌细胞系进行检测。 (1)DU145(ATCC,HTB-81)(2)PC3(ATCC,CRL-1435)(3)LNCap(ATCC,CRL-1740)二、仪器 1. SpectraPLUS酶标仪三、步骤 1. 标准曲线制备: (1)在96孔板中加入100 μL 培养基,然后接种适量细胞,贴壁细胞控制在40~10 000/孔
浅析染色质免疫沉淀(ChIP)技术在 DNA 与蛋白质相互作用研究中的重要性
等人 [20] 于近期首先发现转录因子 Tcf-4 和 β-catenin 共同上调 c-Myc 基因调控因子 enhance E 的表达,然而 luciferase reporter 实验结果仅能证明 β-catenin 和转录因子 Tcf-4与enhance E 的相关性,无法提供证据表明这两种细胞因子如何作用于 enhance E 基因上。因此,他们采用了 ChIP 技术,证明前列腺癌 LnCAP 细胞中是 Tcf-4 而不是 β-catenin 直接结合到 enhance E 基因上,这就表明
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