土壤RNA试剂盒

产品简介
在环境样本RNA提取中，对提取效果影响最大的就是样本中广泛存在的腐殖酸等抑制因素。本试剂盒采用独特的缓冲液系统，适合于从不超过500mg土壤、底泥、水体滤膜、发酵液残渣等环境样本中提取微生物RNA。试剂盒基于硅胶柱纯化技术，纯化柱优选高性能的超细玻璃纤维滤膜为材料，高效专一吸附RNA。得到的RNA可直接用于RT-PCR、Northern Blot、Poly A纯化，核酸保护和体外翻译等实验。

提取流程

本产品采用特殊缓冲溶液加玻璃珠破碎样本，再过硅胶柱以高结合力的玻璃纤维滤膜为基质。滤膜在高浓度离子化剂(如盐酸胍或异硫氰酸胍)条件下，可通过氢键和静电等物理化学作用吸附核酸，而蛋白质和其它杂质则不被吸附而去除。吸附了核酸的滤膜经洗涤去除残留的蛋白质和盐，最后可以用低盐缓冲液或水，洗脱出滤膜上吸附的核酸。

产品优势
专用性强：主要为提取土壤核酸设计
可靠：操作简单，可达到理想效果
应用广泛：可直接用于RT-PCR、Northern Blot、Poly A纯化等实验

主要作用	从小于500mg土壤样品提取RNA
纯化产物	RNA
下游应用	RT-PCR、Northern Blot、Poly A纯化，核酸保护和体外翻译等
纯化方式	小量柱
纯化技术	玻璃纤维滤膜
操作方法	离心操作或抽滤操作
样品类型	土壤、底泥、水体滤膜、发酵液残渣等环
样品用量	0.5g
最少洗脱体积	30ul
操作时间	45分钟内
柱子每次载液体积	800ul
柱子最大核酸载量	70ug

• 问：土壤样品中的水分含量比较多
  答：土壤样品中的水分含量比较多，建议先将水分离心去除后再进行提取。
• 问：RNA发生降解如何解决？
  答：1土壤 RNA 产量主要来源样品内微生物、植物动物残渣，冰冻或贮存过程中 RNA 会发生不同程度的降解导致 RNA 含量降低或条带成较严重的涂抹状（即降解）。建议尽量使用新鲜样品或贮存时间较短样品进行 RNA 提取。
  2.裂解液的用量不足。如果将裂解液直接加入培养皿中裂解细胞的话，一定要使裂解液能覆盖住细胞。
  3.某些富含内源核酸酶的样品（如肝脏，胸腺等），即使使用电动匀浆器匀浆也不能避免 RNA的降解。更可靠的方法是：在液氮条件下将组织研碎，并且匀浆时使用更多裂解液。
  4.外源RNA酶的污染：试剂，器械及实验环境中的RNA酶进人实验系统。
  5.内源RNA酶的污染：抑制剂失效或者用量不够，实验样品过多；匀浆时温度过高。
• 问：下游需进行荧光定量实验或其他对 DNA 污染敏感的实验
  答：建议购买DNase I 在提取过程中进行快速膜上 DNA 消化，产物无需灭活或再次纯化，可直接应用于反转录及荧光定量实验检测。
• 问：出现堵柱子的情况，如何解决
  答：1.初始样品量：过多的样品量不但不会增加产量，反而可能会导致堵柱子。
  2.若出现堵柱子的情况，可适当延长离心的时间，可帮助样品完全转移过柱，在下次提取时必须减少样品用量。
  3.裂解不充分：如不宜减少样品用量，尽可能吹打样品使其充分裂解。