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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
详见说明书
- 供应商:
广州华韵生物科技有限公司,www.huayunbio.cn
- 规格:
10次
本试剂盒采用改良型一步法抽提试剂与柱法纯化技术相结合,适合从各种抗凝血液、冻存血液、白膜层、血清、血浆等液体样品中快速提取高纯度总RNA,包括miRNA。提取的总RNA纯度高,基本没有蛋白和其它杂质的污染,可用于RT-PCR、Real Time RT-PCR、芯片分析、 Northern Blot、Dot Blot、PolyA 筛选、体外翻译、RNase 保护分析和分子克隆等多种下游 实验。
本试剂盒采用玻纤滤膜纯化持术,只需进行简单的结合-洗涤-洗脱的步骤。首先血液等液体样品经过红细胞裂解液处理后将红细胞除去,然后在样品中加入裂解液使其裂解,然后加入氯仿抽提,加入乙醇结合液调整至最佳的结合条件后转移至纯化柱中并离心,RNA被选择性地结合到滤膜上,而蛋白质等杂质被滤出到滤液中。经过三次洗涤步骤除去了残留的污染物和酶抑制剂,最后RNA被少量的水或缓冲液洗脱出来。
高品质:高纯度的总RNA,可直接用于各种敏感的下游应用
快速:柱式纯化方式,可在40分钟内完成数个样品的提取工作
适用性强:适合从各种抗凝血液、冻存血液、白膜层等液体样品中提取高纯度总RNA
| 主要功能 | 从血液样品中提取RNA |
| 纯化产物 | 总RNA |
| 下游应用 | RT-PCR、 定量RT-PCR、Northern杂交、二代测序 |
| 纯化方式 | 小量住 |
| 纯化技术 | 玻纤滤膜纯化柱 |
| 操作方法 | 离心操作 |
| 样品类型 | 新鲜或冻藏的血夜;哺乳动物血液 |
| 样品用量 | ≤1.5 ml 全血 |
| 产量 | 2-100ug |
| 最少洗脱体积 | 20μl |
| 柱子每次载液体积 | 800µl |
| 柱子最大核酸载量 | 70ug |
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问:人体血液的细胞组成是什么?答:一毫升健康的人体血液由大约以下数字的细胞类型组成:
白细胞(功能:免疫反应)4-7 x 10*6个
细胞血小板(功能:伤口闭合)3–4 x 10*8个细胞
红细胞(功能 O2 和 CO2 转运)5 x 10*9个细胞 -
问:RT-PCR实验效果欠佳或者失败,如何解决?答:1.RNA降解:从采样开始,血液中的 RNA 就开始降解,该过程是一直存在的,建议采用新鲜样品进行提取;如采样后需储存样品,建议储存到-80℃中减缓降解的速度,并尽快提取。
2.抽提试剂的残留:加入萃取液后充分混匀,并且要保证离心分层时一定的离心力和时间。
3.DNA 污染:目前提取RNA的方法中,没有任何一种方法能够做到完全去除DNA。因此,无论采用哪种方法,提取到的RNA或多或少会有DNA污染,如果需要彻底去除DNA污染,建议使用DNase1消化抽提的RNA。
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