- ￥600
- 华韵生物(Huayunbio)
- HYK0073-14
- 2026年03月06日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
详见说明书
- 供应商：
广州华韵生物科技有限公司，www.huayunbio.cn
- 规格：
10次
本试剂盒采用珠磨法与柱法纯化技术相结合，适合从不超过200mg粪便样品中快速提取高度总DNA。纯化柱优选高性能的超细玻璃纤维滤膜为材料，高效、专一吸附DNA。本试剂盒采用独特的缓冲液系统，可以将动物粪便、人体粪便、以及其它环境样本中的腐殖酸和粘多糖尽可能的去除；并且配有的研磨珠可有效破碎粪便样本中的各种复杂成分，保证提取基因组DNA的完整性。使用本试剂盒回收的DNA杂质少，完整性好，可直接用于PCR、酶切等其它分子生物学下游实验。
本试剂盒采用玻纤滤膜纯化技术，只需进行简单的结合-洗涤-洗脱的步骤。粪便类样品在特殊的试剂和0.6-0.8mm锆珠中进行珠磨，DNA从胞内充分释放出来，加入沉淀剂和结合液去除蛋白质、多糖和腐殖酸等杂质，离心得上清后加入结合液调整最佳的结合条件后转移至纯化柱中并离心，DNA被选择性地结合到滤膜，而杂质被滤出到滤液中。经过两个洗涤步骤除去了残留的污染物和酶抑制剂，最后DNA被少量的水或缓冲液洗脱出来。
快速：步骤少，操作简单，节省时间
可靠：标配研磨珠可有效破碎粪便样本中的各种复杂成分
| 主要功能 | 从动物粪便样品中提取总DNA |
| 纯化产物 | DNA |
| 下游应用 | PCR、Southern 杂交、酶切、二代测序等 |
| 纯化方式 | 小量纯化柱 |
| 纯化技术 | 玻纤滤膜纯化柱 |
| 操作方法 | 离心操作或抽滤操作 |
| 样品类型 | 粪便 |
| 样品用量 | 粪便：不超过200mg |
| 最少洗脱体积 | 50µl |
| 操作时间 | 不超过50分钟 |
| 柱子每次载液体积 | 800µl |
| 柱子最大核酸载量 | 70ug |
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问：基因组DNA 的得率较低或无基因组 DNA，如何解决？答：1.粪便 DNA 产量主要来源样品内微生物、食物残渣含量，冰冻贮存过程中 DNA 会发生不同程度的降解导致 DNA 含量降低或条带成较严重的涂抹状（即降解）。建议尽量使用新鲜样品或贮存时间较短样品进行 DNA 提取。
2.粪便样品主要是加入锆珠后进行涡旋裂解，涡旋后应是个均匀的状态，如果涡旋后明显是不均匀的或有成块的情况，可适当延长涡旋时间至其完全混匀。对于较大或较硬的样品，可在加入玻璃珠之前先将其碾压细碎。
3.DNA 洗脱不适当：洗脱缓冲液pH 值过低会阻碍 DNA 从硅胶膜上洗脱下来，应确保洗脱液 pH值在7.0-8.5之间，洗脱液应该滴在纯化柱膜中央。洗脱时可将洗脱缓冲液在65-70°C水浴预热，加人洗脱液后在室温静置2-5分钟，可提高洗脱效率，加大 DNA产量。 -
问：使用LY308提取的DNA的质量和大小是否足以生成用于下一代测序的DNA文库？答：使用LY308试剂盒获得的DNA大小在100 bp至50 kb之间，其中以30 kb片段为主。30 kb 的片段是大多数文库准备工作的良好起点。此外，纯化的 DNA 不含蛋白质、核酸酶和其他污染物和抑制剂，因此适用于 NGS。
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问：提取的基因组 DNA 不能顺利进行后续实验，如何解决？答：得到基因组DNA后，一般需要进行PCR,酶切等其它分子生物学下游实验。如不能顺利进行，则主要原因即为DNA样品不纯，内含有影响内切酶、DNA 聚合酶发挥活性的杂质，如蛋白、有机溶剂、盐类等。
1.样品量过多导致细胞裂解不充分：
样品量过多，使裂解液不能有效与样品混合，导致裂解不彻底，残留大量蛋白、多糖、脂类等杂质，为后续的上吸附柱分离纯化造成影响。
2.DNA 在洗脱前，有大量乙醇残留：
有机溶剂乙醇可严重抑制内切酶、DNA 聚合酶的活性，而在 DNA过柱洗涤过程中均使用含有乙醇的去蛋白液和漂洗液，因此在洗脱 DNA 前，一定要充分去除残留的乙醇，可重复离心，或将吸附柱置于室温活50°C温箱中烘干5-10分钟，再加洗脱液。
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文献和实验粪便污染指示菌（faeces pollution index bacteria）
水体中的病原微生物常因数量较少而难以检出，即使检出结果为阴性，也不能保证无病原微生物存在；同时检出手续也很复杂。所以，在实际工作中常借用检查水体中有无“指示菌”存在及其数量多少来判定水质是否被污染。这在水的卫生学检查方面有较重要的意义。一般将大肠菌群、粪链球菌、产气荚膜杆菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌等作为粪便污染指示菌，其中以大肠菌群指数（亦称大肠杆菌指数）最常使用。大肠菌群指数（coli-index）指1升水中含有的大肠菌群数。大肠菌群是一群以大肠埃希氏菌为主的需氧
食物经消化道通过机械性消化和化学性消化使食物分解成为结构简单的小分子物质，被小肠、大肠吸收进入血液和淋巴循环，从而为机体新陈代谢提供必不可少的物质和能量来源。未被吸收的食物残渣、消化道的分泌物、无机盐、水、粘液、肠道脱落细胞和细菌等形成粪便（feces, stool），通过直肠由肛门排出体外。健康人粪便的主要成分包括：①少量未被完全消化、吸收的食物残渣，如肌肉纤维、植物细胞、淀粉颗粒、食糜等。②消化道脱落的肠上皮细胞及肠道常驻细菌。③消化道分泌物，如粘液、酶类、粪胆原
1、粪便颜色 正常颜色：成人呈黄褐色，婴儿为黄色或金黄色。 临床意义：柏油色，见于上消化道出血等。红色，见于痢疾、结肠癌、痔出血等。陶土色，见了各种原因所致阻塞性黄疽等。绿色，见于婴儿消化不良等。黄绿色，见于伪膜性肠炎等。 2、粪便形态 正常形态：成形软便。 临床意义：粥样或水样稀便，见于急性胃肠炎、食物中毒、伪膜性肠炎等。粘液性或脓血性便，见于痢疾、溃疡性结肠炎、大肠炎、小肠炎、结肠癌、直肠癌等。凝乳块便，见于婴儿乳汁消化不良等。细条状便，见于
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