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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海谷研
- 库存:
51
- 英文名:
IL-1a
- 规格:
详见说明书
1. 50ml 配制好的RPMI1640培养液1瓶;8ml小牛血清(FCS) 1瓶;100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶;PBS(-)1 瓶
2. 100ml灭菌烧杯2个; 人皮肤成纤维细胞,CCC-HSF-1细胞
3、50ml离心筒2个
4、灭菌培养皿1个,细胞培养瓶1个
5、1ml ,200μl移液器各1支;枪头盒2个;无菌玻璃搅拌棒1个
6、细胞计数板1块;
7、灭好菌的镊子1把,剪刀1把;
8、酒精灯1台;
| 产品名称 | 小鼠L细胞价格 |
| 种属 | IL-1a |
| 价格 | 来电可享受优惠 |
资源名称 小鼠L细胞
种属:IL-1a
形态:成纤维细胞样
培养方法
培养基:RPMI1640(w/oHepes)10%FBS
生长特性:半贴壁生长
收到细胞后,在倒置镜下(4X物镜)观察整个细胞生长情况:
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,换 10ml新鲜培养液后继续培养。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。
小鼠L细胞价格具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒放于37℃培养箱1-3分钟预热,之后翻转培养瓶10-30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加完全培养基,轻轻打匀后吸出一半,分到新的培养瓶中。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 胰酶和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织完全被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
SH3B4 Polyclonal Antibody SH3结构域结合蛋白4 抗体
SH3K1 Polyclonal Antibody SH3结构域激酶结合蛋白1 抗体
SHAN3 Polyclonal Antibody SH3和多样锚蛋白重复域蛋白3 抗体
STAC3 Polyclonal Antibody SH3和半胱氨酸丰富域含蛋白3 抗体
STAC Polyclonal Antibody SH3和半胱氨酸丰富域含蛋白 抗体
SH2D3 Polyclonal Antibody SH2域含蛋白3C 抗体
SH23A Polyclonal Antibody SH2域含蛋白3A 抗体
SH21A Polyclonal Antibody SH2域含蛋白1A 抗体
SH2B3 Polyclonal Antibody SH2B衔接蛋白3 抗体
SGSM2 Antibody (Center) (Small G protein signaling modulator 2, RUTBC1) SGSM2抗体(中间区域)
小鼠L细胞价格BPTES产品规格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg
BPTES是一种有效的glutaminase抑制剂,用于癌症研究。
注:本品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他用途!
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储存条件:-20℃,有效期2年,溶入溶剂后-20℃请尽量在一个月内使用。
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文献和实验小鼠凋亡相关因子配体(sFas-L)ELISA试剂盒 说明书
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 小鼠凋亡相关因子配体 (sFas-L)ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗小鼠 sFas-L 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 sFas-L与单抗结合,加入生物
小鼠外周血单细胞悬液制备 采集小鼠外周血样本于抗凝管中。 离心管内加入 100 μL 新鲜血,加入 1 Test 对应流式抗体,混匀,4℃ 避光孵育 30 min。 加入 2 mL 1×红细胞裂解液,混匀,4℃ 裂解 5 min。 300 g 离心 5 min(裂解完立即离心,防止时间过长损伤细胞),弃上清可得到白色的细胞沉淀。 PBS 洗涤一遍。 加入 200 μL 细胞染色缓冲液重悬细胞,用流式细胞仪进行检测和分析。 注意事项: 采血用抗凝管,有肝素和 EDTA 两种,若直接裂解
,最后取 5μL 2000 倍稀释样本到 245μL 标准品&样本稀释液内,做 50 倍稀释,总共稀释 100000 倍; 每步稀释时,取液量不少于 3μL,稀释倍数不超过 100 倍。每步稀释都需混合均匀。 Q3:大小鼠采血容量? A3:根据实验方案所需采血量的要求,我们可以选择不同的采血方式。 鼠尾采血法: 取血量较少时,采用此方法。通常选择剪断尾巴进行采血。亦可不剪尾,用 7-8 号注射针头刺入尾静脉采血。 小鼠每次可取血 0.1mL,大鼠每次可取血 0.2~0.4mL,可多次反复采血
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