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文献和实验细胞沉淀后,加入预冷的 RIPA 液(含PMSF),RIPA 液的用量:按照 0.5 mL 每 5×106 细胞计算。轻轻混匀细胞悬液,用振荡器在 4℃ 振荡 15min 以裂解细胞。 用经蒸馏水预冷的橡皮或塑料细胞刮棒将贴壁细胞转移至一离心管中。 于 4℃,10000 rpm 离心裂解液 15 min,迅速转移上清至另一离心管中,弃掉沉淀。 将 Agarose protein A+G 珠子混匀:用预冷的 PBS 洗涤 Agarose protein A+G 珠子两次,并将其用 PBS 调
小鼠胸腺单细胞悬液制备流程 1.用颈椎脱臼法处死小鼠,75%酒精浸泡5 min后,取出小鼠置于无菌操作台上,腹部朝上。 小鼠胸骨下方剪开小鼠的胸腔,可看到白色透明胸腺,呈两叶分布,位于两肺的前方,胸骨的正后方。 取出胸腺并浸泡于干净的PBS溶液中。 将胸腺置于200目筛网中,用组织研磨棒轻轻研磨至没有明显块状物。 用15 mL PBS冲洗筛网,并将冲洗液收集于15 mL离心管,300 g离心5 min,弃上清。 用细胞染色缓冲液重悬胸腺细胞,并调整细胞浓度至1×107/mL。 注意
机、离心机、分析天平; 粗天平、旋光仪及附件、三角瓶、分样筛(100目)、布氏漏斗、抽滤瓶及真空泵、离心管、小电炉。 原料 面粉或其他风干样品 试剂 1. 醋酸—氯化钙溶液: 500g 氯化钙溶于600mL 蒸馏水中,过滤至澄清,用比重计在20℃条件下调节比重1.3左右,再滴加冰乙酸调pH 为2.3。 2. 30%ZnSO 4 溶液 3. 15%K
技术资料暂无技术资料 索取技术资料






