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文献和实验的。 实验室常用的蛋白标准品多是来自NEB、MBI、GE、Bio-Rad 、Invitrogen、Novagen、Promega、MRESCO、Pierce Bio. 等品牌,生物帮2-D 蛋白 MW Markers产品推荐:Marker for 2D Electrophoresis 、ColorBurst(TM) Electrophoresis Marker 、Myoglobin, Carbamylated 2D Electrophoresis Marker from equine heart
蛋白质印迹(Western blotting)方法原理和优化
变性电泳分离天然蛋白质。尽管这种方法通常缺乏变性电泳的分辨率,但当蛋白须保留生物活性时非常有用。 二维(2-D)凝胶电泳用于分析细胞、组织、和体液蛋白质的组成,是现代蛋白质组学的关键技术。2-D免疫印迹可提供分子量和等电点信息,并可用于区分翻译后修饰产生的不同蛋白质形式。有些情况下只进行1-D电泳分离也可用免疫印迹对蛋白分型。 分子量标准 在凝胶中加入分子量标准或标记物可以在电泳分离后估计感兴趣蛋白质的大小。有两种类型的分子量标准:未染色和预染色。未染色分子量标准通常由天然
免疫电镜技术组织的取材与固定 免疫电镜技术是根据抗原与抗体特异性结合的原理,利用高电子密度的标记物标记抗体或用经免疫组织化学反应能产生高电子密度产物的标记抗体,在超微结构水平对抗原进行定性、定位的技术方法。Singer于1959年首先建立了用电子密度较高的铁蛋白(ferritin)标记抗体的方法,可对细胞表面抗原进行超微结构定位。该技术为免疫 电镜技术的发展奠定了基础。Nakane与Pierce于1968年成功建立了免疫酶标记电镜技术,使细胞内抗原的超微结构定位成为可能
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