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- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | M0317 | T3 DNA 连接酶 | T3 DNA Ligase |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| M0317L | T3 DNA 连接酶 | T3 DNA Ligase | 750,000 units |
| M0317S | T3 DNA 连接酶 | T3 DNA Ligase | 100,000 units |
产品特点
T3 DNA 连接酶将连接以下底物:
双链 DNA
切刻的 DNA/RNA
1. 注意:可通过过夜温育连接痕量的该底物,并在 Stick Together DNA 连接酶缓冲液中进一步增强连接效果。请注意,平末端 TA 连接酶预混液是该底物的推荐连接酶产品。
- T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体,是一种 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶
- 耐盐性是 T4 DNA 连接酶的 2 倍
- 该产品提供更大包装。如需了解更多信息,请提交询问表。
- 不确定选择哪种连接酶? 请参阅 DNA 和 RNA 连接酶特性表或 DNA 连接酶选择指南
T3 DNA 连接酶来源于 T3 噬菌体,是一种 ATP 依赖型双链 DNA 连接酶。该酶可催化双链 DNA 相邻的 5´ -磷酸基团和 3´ -羟基基团之间形成磷酸二酯键。T3 DNA 连接酶可以高效催化粘性末端、平末端和切刻位点连接(1)。与 T4 DNA 连接酶一样,在反应中加入 PEG 6000 可以提高平末端连接效率(2)。与 T4 DNA 连接酶相比,T3 DNA 连接酶在反应中对 NaCl 的耐受性更高(2 倍),因而成为需要 DNA 连接酶活性的体外分子生物学方案的通用选择。
产品来源
大肠杆菌菌株,含有编码 T3 DNA 连接酶的重组基因。- 产品类别:
- DNA 连接酶产品
- 应用:
- Cloning Ligation
备注:以上仅为 M0317 的部分产品信息,如需NEB货号 M0317 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验【交流】关于NEB的T4 DNA连接酶和快速连接试剂盒的常见问题及解答
因为看到园子中使用NEB T4 DNA连接酶的老师和同学比较多,也经常就一些连接的问题进行讨论和沟通。今天发一个关于NEB T4 DNA连接酶的一个专题,就使用过程中一些常见问题跟大家讨论一下。也希望各位老师同学能够踊跃参与,如果大家有什么疑问或者好的建议欢迎。 一、关于NEB M0202 T4 DNA 连接酶的使用方法和常见问题及解答 1、产品特性和使用方法 产品说明:该酶催化契合的双链DNA或RNA的5'-磷酸末端和3'-羟基末端形成磷酸二酯键。该酶不仅能够催化平滑
1X反应缓冲液成分: 50mMTris-HCl 10mMMgCl2 1mMATP 10mMDithiothreitol pH7.5@25°C 酶活定义: Oneunitisdefinedastheamountofenzymerequiredtogive50%ligationofHindIIIfragmentsofλDNA(5′
酶HhaⅠ(GCGC)或HpaⅡ(CCGG)的识别位点,这样,经探针和目标序列杂交后,降低反应体系温度,并向其中加入连接酶HhaⅠ,若原样本DNA中含有HhaⅠ识别的非甲基化的位点,则非甲基化探针的两个寡核苷酸部分不能连接,而甲基化的探针顺利连接不被切割,在随后的PCR反应中只有两个寡核苷酸部分连接后的探针才能被扩增。最后分析扩增片段,确定待研究位点的甲基化情况(具体过程见图8)。 图8:甲基化特异性多连接依赖性探针扩增(MS-MLPA)示意图。用设计好的甲基化与非甲基化的探针(探针各寡核苷酸部分
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