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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
| 品牌 | 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 |
|---|---|---|---|
| NEB | N3033 | pBR322 载体 | pBR322 Vector |
| 货号 | 产品中文名称 | 产品英文名称 | 规格 |
|---|---|---|---|
| N3033L | pBR322 载体 | pBR322 Vector | 250 µg |
| N3033S | pBR322 载体 | pBR322 Vector | 50 µg |
产品特点
- View sequence details
- pBR322 DNA is a commonly used plasmid cloning vector in E. coli (1).
- The molecule is a double-stranded circle 4,361* base pairs in length (2).
- pBR322 contains the genes for resistance to ampicillin and tetracycline, and can be amplified with chloramphenicol.
- The molecular weight is 2.83 x 106 daltons.
*Sequencing data from Watson (confirmed at New England Biolabs, Inc.) has shown pBR322 to be 4,361 base pairs, not 4,363 base pairs as previously reported.
DNASU 和 Addgene 是可能有帮助作用的质粒克隆和收集的中央存储库。
产品来源
pBR322 从大肠杆菌 ER2686(dam +dcm + EcoK M-)通过标准质粒纯化程序提取。- 产品类别:
- DNA 质粒及底物产物
备注:以上仅为 N3033 的部分产品信息,如需NEB货号 N3033 的完整产品信息及相关的实验操作手册等等,请通过NEB官网查找对应的货号获取。
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文献和实验1),尿嘧啶合成酶基因(URA3),亮氨酸合成酶基因(LEU2),组氨酸合成酶基因(HIS4)等。 3) 生化标记基因。这类标记基因的表达产物可催化某些易检测的生化反应,常用的基因有β-半乳苷酶基因(lacZ)、葡萄糖苷酸酶基因(GUS)、氯霉素乙酰转移酶基因(CAT)。 为了进一步说明载体的结构和各个结构的功能,下面举一个在基因工程中使用比较频繁的大肠杆菌载体—pBR322作为例子。 大肠杆菌载体pBR322 载体pBR322是由Bolivar 等人于1977年构建的。该载体
都中止。但松弛型质粒仍继续进行复制。因此在增殖松弛型质粒时,总是要让宿主菌经氯霉素处理(在培养液中加入适量的氯霉素)抑制蛋白质的合成。图23-3 pBR322的基本结构(一)大肠杆菌质粒应用的最广泛的质粒载体是pBR322,它属松弛型质粒,有抗氨苄青霉素和抗四环素两个抗性基因可作为标记基因,有许多种常用的限制酶的切点。它全长4352个核苷酸,排列顺序已全部测定,基本结构如图23-3。当需要用pBR322来克隆BamHI酶切的一个DNA片段时,一般的做法是如图23-4所示。图23-4 pBR322克隆
载体(Vector)是把外源DNA(目的基因)导入宿主细胞,使之传代、扩增、表达的工具。载体有质粒(plasmid)、噬菌体、单链丝状噬菌体和粘性末端质粒(粘粒)、病毒等。载体具有能自我复制;有可选择的,便于筛选、鉴定的遗传标记;有供外源DNA插入的位点;本身体积小等特征。 质粒存在于多种细菌,是染色体(核)以外的独立遗传因子,由双链环状DNA组成,几乎完全裸露,很少有蛋白质结合。质粒有严紧型和松弛型之分。严紧型由DNA多聚酶Ⅲ复制,一个细胞可复制1-5个质粒。而松弛型由DNA
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