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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
hFOB 1.19
- 库存:
990
- 供应商:
澳睿赛生物技术(上海)有限公司
- 肿瘤类型:
详见说明
- 细胞类型:
其他类型
- 品系:
细胞系
- 组织来源:
详见说明
- 相关疾病:
详见说明
- 物种来源:
人
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 器官来源:
详见说明
- 运输方式:
常温或者干冰运输
- 年限:
不限
- 生长状态:
贴壁细胞
- 规格:
1*10^6cells/T25方瓶
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一、细胞基本属性
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细胞名称
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HFOB1.19人SV40转染成骨细胞
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细胞别称
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hFOB1.19; hFOB;人SV40 转染成骨细胞
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商品货号
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ORC0243
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种属来源
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人
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年龄性别
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胚胎
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组织来源
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胚胎骨;成骨细胞;以SV40巨细胞抗原转染
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生长特性
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贴壁生长
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细胞形态
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上皮细胞样
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背景简介
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hFOB 1.19细胞在0.6mg/ml新霉素G418存在下,用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然流产的胎儿四肢组织,建立了此细胞系。在33.5℃温度下细胞分裂很快,而在限制温度39.5℃下细胞极少分裂或不分裂。这些细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。这些细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统,用于研究正常人造骨细胞的分化,造骨细胞生理和激素,生长因子,和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。
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生物安全等级
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2
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细胞规格
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1×106cells/T25培养瓶或者1mL冻存管包装
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支原体检测
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无
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基因表达情况
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alkaline phosphatase
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保藏机构
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ATCC; CRL-11372
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培养基
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DF12+10% FBS+1% PS
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培养条件
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气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
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冻存条件
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无血清冻存液,液氮储存
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倍增时间
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STR鉴定位点
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文献和实验光素酶活力。在完成萤火虫荧光素酶活力(“实验”报告基因)的测定后,萤火虫发光被快速湮灭,并同时激活海洋腔肠荧光素酶的发光反应(“对照” 报告基因)。因此,DLR测试系统整合了两个测试化学,对共表达的两个报告基因作快速地定量,酶来自转染细胞裂解液,或无细胞转录翻译反应。萤火虫荧光素酶测试的线性范围延伸达酶浓度的8个数量级,可测定≤1fg (大约10 -20 摩尔)的实验报告基因酶(图3A)。用双荧光素酶报告基因测试系统,海洋腔肠荧光素酶的线性范围达酶浓度的7个数量级,较低的底限是≤10fg (大约3×10 -19
选择是RNAi实验成败的关键。哺乳动物细胞RNAi实验中,使用最广泛且最有效的是21bp siRNA。siRNA由正义链和反义链组成,两条链3’端均有2个碱基突出,一般为UU或dTdT,其中正义链的前19nt与靶基因序列相同。1. siRNA设计的原则SiRNA双链设计时,一般在靶mRNA起始密码下游100—200bp至翻译终止密码上游d0—100bp的范围内搜寻AA序列,并记录每个AA3’端相邻19个核苷酸作为候选si.RNA靶位点。其中AA(N19)TT是最理想的序列,若靶mRNA中无此序列,亦可
/ml,确保转染时细胞没有长满或处于静止期。因为转染效率对细胞密度很敏感,所以在不同实验间保持一个基本的传代步骤很重要。铺板细胞数目的增加可以增加转染活性和细胞产量。细胞的融合度必须要达到90%才能做。 05启动子的选择 获得高转染活性所需选择的启动子依赖于选用的细胞系和要表达的蛋白。CMV启动子在大多数细胞类型中可以获得高表达活性。同其他启动子,如SV40和RSV(劳斯肉瘤病毒)相比,在BHK-21中其活性最高。这三种病毒启动子在T细胞来源的细胞系,如Jurkat中组成表达水平较低。转染
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