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人SV40转染成骨细胞hFOB
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上皮细胞样
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常温/干冰
10年
良好
提供STR鉴定报告
细胞名称:hFOB 1.19 SV40转染人成骨细胞组织来源:骨;成骨细胞;以SV40巨细胞抗原转染培养条件:DMEM:F12 +0.3 mg/mL G418 +10% FBS;33.5℃培养形 态:贴壁背 景:在0.6mg/mL新霉素G418存在下,用温度敏感的表达载体pUCSVisA58转染自然流产的胎儿四肢组织,建立了此细胞系。 在许可温度33.5℃下细胞分裂很快,而在限制温度39.5℃下细胞极少分裂或不分裂。 这些细胞具有分化为表达造骨细胞表型的成熟造骨细胞的能力。 这些细胞提供了一个同质化的快速增殖模型系统,用于研究正常人造骨细胞的分化,造骨细胞生理和激素,生长因子,和对造骨细胞的功能及分化有影响的细胞因子。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通交流。
贴壁细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5-6ml完全培养基终止消化。
3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
悬浮细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作)
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数细胞培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
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