Human GOLGA8G qPCR Primer Pair

qPCR引物设计，Primer3 Plus 和 Primerbank 都能搞定！

引物设计是 qPCR 非常重要的环节。今天小编给大家推荐 2 款简单实用的在线 qPCR 引物设计网站，让你分分钟搞定 qPCR 引物！Primer3 Plus严格的 qPCR 引物设计一般要求其中一条引物要跨外显子，最好在 3' 端设计引物，产物的长度在 300bp 以内等。本在线软件可满足 qPCR 引物设计的要求。网址链接：http://www.primer3plus.com/1、选择 Run latest Versionof Primer3Plus，就进入了设计引物的主页面，合理的使用

学会这个方法，5 分钟找到合适的 qPCR 引物

找的基因后，在几对引物中选择自己看着顺眼的那对拿去合成就好了。开玩笑啦，还是有选择标准的：首先看看 Amplicon Size，也就是扩增长度，建议在 100~300bp 间比较好扩增；引物长度在 20~25bp 较好，而且上下游引物间不要相差超过 5bp；再就是看看 Tm 值，60℃左右，相差不要超过 1℃。综上，将选择好的引物（这里我选择 Primer Pair 3），进一步验证，这里很友好，支持复制粘贴。5. 还是回到 Pubmed，打开里面的 primerblast。网址是：https

逆转录、qPCR 实验还出错？这几点你可能没注意！

%，避免引物内含有互补序列，3』端尽量不要出现含有连续三个以上的 G 或 C 的片段，真核基因设计引物时最好跨内含子哦。 选择合适 ROX 参照染料 各位同学在选购产品、做实验时，首先要弄清自己实验室的仪器对应哪种 ROX（High 还是 Low）！试剂买回来，样也加好了，最后发现不能用在自家仪器上，内心也一定是很崩溃。诺唯赞的染料法荧光定量专用预混液提供各种 ROX 供选择，如果不想这么麻烦，ChamQTM Universal SYBR® qPCR Master Mix （Q711）那是极好