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北京柏瑞图科技有限公司
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20ul
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文献和实验[3] 将细胞裂解物分离成 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分,发现在两个组分中都可以检测到 TDP-43 的磷酸化片段。同样的,用 RIPA 缓冲液裂解小鼠 MEC 细胞时,磷酸化的 EGFR(pY-1068 EGFR)只在 RIPA 可溶性组分中检测出。然而,磷酸化的 c-Src(pY-416 c-Src)则在 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶组分中都能检测出, 甚至 WT 样品在 RIPA 不可溶组分中的信号比 RIPA 可溶性组分中更强(下图),结果表明如果仅使用 RIPA 可溶性组分
pY505)。由此形成Src分子携带的SH2结构域和同一个分子C端pY相结合的条件,这一结合使该分子的C端卷曲起来,遮掩了SrcPTK活性中心即催化结构域上的激活性酪氨酸残基Y394,使之不能发生磷酸化。因而,在未致敏T细胞中,SrcPTK是没有活性的。 这时有待分化抗原CD45发挥作用。CD45分子胞内段有两个结构域,行使蛋白酪氨酸磷酸酶的功能。它们可使底物上的pY变成Y,条件是CD45需要紧靠其底物。显然,上面提到的多聚作用可使Src和跨膜分子CD45相聚。于是CD
Analysis of SH2 Ligands and Identification of Sites of Interaction
complexes. Src homology 2 (SH2) domains are protein modules of approx 100 amino acids that recognize and bind to specific phosphotyrosine-containing polypeptide sequences (1 ). SH2 domains are recruited to tyrosine-phosphorylated proteins in their normal
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