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10
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北京柏瑞图科技有限公司
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1000 ml
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文献和实验下,经过快速的洗脱步骤,得到高纯度、高浓度的目标蛋白 (> 95%) 。 Strep-Tactin® 与 Strep-Tactin®XT 纯化流程的差异主要在于: 将靶蛋白从 Strep-Tactin®XT 洗脱时,需使用含有 50 mM Biotin (生物素) 的 Buffer BXT (由于亲和力大幅提升,Desthiobiotin 不能有效的洗脱靶蛋白。) 再生 Strep-Tactin®XT Superflow® 填料时,需使用 10 mM NaOH (因使用生物素进行洗脱
MHC I STREPTAMERS® 检测与分离抗原特异性 (CD8+ T) 细胞
通过 TCR 与 MHC 多肽复合物间的特异性识别作用,可以对抗原特异性 T 细胞进行检测和分离。然而,当 MHC 多肽复合物为单体状态时,其与 T 细胞的结合并不稳定。若将其四聚体化后,其与 TCR 的结合可保持在一个稳定的状态,成为检测的工具。德国 IBA Lifesciences 研发的 MHC I STREPTAMERS® 技术,利用了这一特点,将传统的链霉亲和素改进为 Strep -Tactin®,搭配荧光标记或纳米磁珠,与多聚化的低亲和力MHC I-Streps 形成复合
Expi Supernatant 进行培养。 纯化过程中,选择柱体积为 0.2 ml 的三种纯化柱:Ni Sepharose 6 FastFlow, Ni Sepharose Excel, 和 Strep-Tactin®XT 4Flow®。 分别用其纯化 60CV (column volume, 柱体积) 和 120CV 的样品,并保持上样样品中的蛋白质含量在纯化柱最大结合载量 80%-95 %。 二、实验结果 01 对比蛋白质回收效率 对于不同的填料,可以从洗脱组分中回
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