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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
小鼠原代骨髓基质干细胞
- 细胞类型:
小鼠原代骨髓基质干细胞
- 肿瘤类型:
小鼠原代骨髓基质干细胞
- 供应商:
上海晅科生物科技有限公司
- 库存:
10
- 英文名:
/
- 生长状态:
长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养
- 年限:
尽快解冻复苏细胞进行培养
- 运输方式:
快递形式
- 器官来源:
小鼠原代骨髓基质干细胞
- 是否是肿瘤细胞:
/
- 细胞形态:
长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养
- 免疫类型:
小鼠原代骨髓基质干细胞
- 物种来源:
小鼠原代骨髓基质干细胞
- 相关疾病:
小鼠原代骨髓基质干细胞
- 组织来源:
实验动物的正常骨髓血组织
- 规格:
5*10^5
细胞详述
骨髓基质细胞在骨髓中数量稀少,是一类具有多向分化潜能的干细胞,其中部分细胞具有自我复制、分裂增殖与多向分化能力,在不同的培养条件下,可分化为骨、成骨、软骨、神经、脂肪等细胞。
细胞特性:1) 组织来源于实验动物的正常骨髓血组织。
2) 细胞鉴定:CD90免疫荧光染色为阳性
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:长梭形细胞,不规则细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置2-3小时以稳定细胞状态,然后换用新鲜完全培养液继续培养或进行传代。

2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml完全培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,最后放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。


3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的90%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入完全培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm离心5min;
3)用适量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=5:4:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。

4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具),快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至含5ml完全培养基的15ml离心管中, 1500rpm离心5min;
3)弃上清,沉淀用5ml完全培养基重悬,接种25cm2培养瓶,于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜完全培养基继续培养。

小鼠原代骨髓基质干细胞注意事项
产品使用
1)本产品仅能用于科研
2) 本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核
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文献和实验骨髓基质干细胞的应用研究表明,骨髓内含有多种干细胞,其中骨髓源的间充质干细胞又被称为骨髓基质干细胞(bone marrow stem cell,BMSC)。各国学者对动物来源的BMSC进行了大量的研究,结果证实可以在体内外定向分化为软骨细胞、成骨细胞及脂肪细胞等多种中胚层来源的细胞。BMSC是目前组织工程种子细胞研究的焦点。作为组织工程种子细胞具有以下优点:取材操作相对简单,对机体损伤小;抽取骨髓后,机体可自行修复、补充相应的细胞成分,因而可重复取材;培养体系成熟,便于推广应用;体外诱导技术
骨髓基质干细胞的分离与培养 骨髓基质干细胞(BMSC)是最常见的成体干细胞,其操作流程比较稳定和成熟。即以BMSC为例,初步阐述成体干细胞具体应用步骤与流程。 (一)骨髓基质干细胞分离培养的准备工作1.配制DMEM培养液取DMEM培养基10g,NaHC03 2.2g,L-谷氨酰胺300mg,维生素C 37.5mg,青霉素10万单位,链霉素10万单位,加适量三蒸水充分溶解后,调节pH值至7.4,补三蒸水至900m1。经无菌0.22btm过滤器过滤后,加FBSl00ml,4℃保存。2.配制
骨髓基质干细胞的诱导分化 1.成软骨诱导骨髓基质干细胞培养7天后,加入软骨诱导液,诱导因子终浓度为TGF-p1 10ng/m1、IGFl00ng/m1、地塞米松0.1/1m01/L,转铁蛋白6.25ug/ml,诱导时间为2-4周。 2.成骨诱导(1)骨髓基质干细胞培养7天后,加入成骨诱导液。诱导液成分为基础培养液加入10mmo]/Lβ-磷酸甘油、10nmol/L维生素D3等诱导成分。(2)特殊染色vonKossa染色:诱导4周,4%多聚甲醛室温固定30rain,蒸馏水冲洗,加入1%(W
技术资料暂无技术资料 索取技术资料








