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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
88
- 供应商:
子科生物
- 检测范围:
详情咨询在线客服
- 检测方法:
酶联免疫分析ELISA方法
- 应用:
仅供科研研究实验
- 适应物种:
人
- 标记物:
详情咨询在线客服
- 样本:
人血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
- 规格:
96T/48T
检测方法:酶联免疫分析ELISA方法
有效期: 4 个月(4℃);8 个月(-20℃)。
保存方法: 2-8℃(频繁使用时); -20℃(长时间不用时)。
品牌:子科生物ZIKER
质量保证:我告诉所有产品均需要经过质检通过后,才允许出库!
适用范围:实验结果仅供科研参考,不推荐用于临床诊断结果。
ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等,子科生物ELISA产品主要用双抗体夹心法。
标本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等
产品性能:灵敏度高,特异性强,重复性。
产品包装:盒(KIT)(含试剂+酶联板+覆膜等)
检测范围:详细请咨询在线客服QQ:2811391951,或拨打销售电话13924667705苏经理。
深圳子科生物ELISA试剂盒优质供应商,拥有10年的研发和生产经验,拥有先进的仪器设备,专业的技术人员和一流的实验技术,目前已经建立强大的实验技术服务平台,品牌设立为:ZIKER。 凡购买我们公司的ELISA相关系列产品,都可以享受免费代测服务,只收取试剂盒的相关费用,实验检测和实验涉及到的试剂全部都是免费提供,并可以提供最终实验数据分析工作。需要代测服务的客户,您只需要准备收集好您的样本,邮寄到我公司实验室,本市的销售人员可以上门取样本,我公司收到样本之后正常是在一周内给您检测报告结果。
需自备试剂和器材
1. 标准规格酶标仪。
2. 自动洗板机。
3. 37℃恒温箱。
4. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器。
5. 干净的试管和 Eppendof 管。
6. 使用中性 PBS 或 TBS 作为洗涤液。0.01M TBS 配法为:1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 纯乙酸 450μ l 或浓盐酸 700μ l 左右调节 pH 值(7.2-7.6)。
0.01 M PBS(pH7.2-7.6) 配法:1000ml 蒸馏水中加氯化钠 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸盐,应加上分子式中水的含量。
9. 蒸馏水
10. 吸水纸
注意事项
1.试剂准备:所有试剂都必须在使用前达到室温,使用后请立即按照说明书要求保存。实验操作中必须使用一次性吸头,避免交叉污染。
2.加样:加样时,要控制加样速度,避免第一孔与最后一孔之见的时间间隔过大,否则将会导致不同的预孵育时间,从而影响实验的准确性以及重复性;一般加样时间控制在10分钟内,如果样本数量过多,可使用多道移液器。
3.孵育:样品要在密闭的容器内进行孵育,严格按照说明书上规定的孵育时间和温度进行。
4.洗涤:洗涤过程中反应孔中的残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干,同时要消除板底残留的液体和手指痕迹,避免影响最后的酶标仪读数。
5.反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,10分钟左右),如果颜色较深,请提前加入终止液终止反应。
6.建议实验前预测样品含量,如样品浓度过高,应对样品进行稀释,计算结果时乘以相应的稀释倍数。
7.建议使用本试剂盒时先做预实验(即先做标准曲线,试用几个标本),如果对本试剂盒有任何疑问,可和所购经销商联系,如果因运输过程导致试剂盒失效,可要求调换,但概不承担产品本身以外的任何损失。
操作步骤
1. 取出试剂盒,于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。
2. 取出酶标板,按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的样品,空白对照加入50μl的蒸馏水;
4. 在样品孔中加入10μl的生物素;(不含空白对照孔,切忌:生物素只加样品孔!)
5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液;(不含空白对照孔)
6. 将酶标板用封口胶密封后,37℃孵育反应 1小时;(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度)
7. 充分清洗酶标板3-5次,保持各孔有充足的水压;(浓缩洗涤液以1:100的比例与蒸馏水稀释)
8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干;
9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl;(不含空白对照孔)
10. 20-25℃下避光反应15分钟;
11.各孔加入50μl终止液,终止反应;
结果判断
1. 30分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;
2. 以OD值为纵坐标,以标准品的浓度为横坐标,绘制曲线图;
3. 根据样品的OD值查找对应的浓度范围;
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文献和实验,不能得到足够的菌量来抽提质粒,摇菌时间一般 12-14 小时为宜。 ③质粒属于低拷贝类型,导致收集的细菌量过少。 ④提取时菌量过多:容易导致裂解不充分,且容易超过硅胶膜柱的承载上限,最终使得质粒提取效率降低,建议参考提取试剂盒建议的菌液量来提取。 ⑤质粒提取实验操作不当:比如在加入缓冲液重悬菌体时,菌体没有充分分散悬浮,导致后续裂解不充分。为指示菌体是否充分裂解,可以考虑在重悬缓冲液中加入指示剂(QIAGEN 质粒提取试剂盒中均有配备 LyseBlue 指示剂),均匀蓝色指示悬浮充分。 ⑥试剂使用
和NF-KB能被分泌到细胞外吗? ws88523758 不要意思,更正一下 我测NF-KB用的是细胞核提取液,用专门的细胞核提取试剂盒;而ikb用的样品是细胞质提取液,是按其说明书自己买试剂盒提取的。 我测的ikb的值较低,我在ELISA用的每孔加50、100、200、300ul,及用1个100mm的培养皿的细胞提取的细胞质,均不能提高ikb的od值,是否存在加大浓度太大,可能再稀释会好点?有人做过吗? 最后先谢谢magichunter的回复
抗血清作为妊娠诊断试剂检定尿液中 hCG,只能用于 hCG 浓度较高的试验,否则妇女生理性排泄入尿液中的微量 LH 将与之发生交叉反应。因此在作为早孕诊断(敏感度应达到 50 mIu/ml hCG)的实验中必须应用只对 hCG 特异的抗 β-hCG,以避免与其它激素的交叉反应的发生。 4. 敏感性 在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为 mg/ml 水平,酶反应测定法的敏感度约为 5~10 μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感
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