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文献和实验Intracellular Cytokine Staining Protocol
TimeRestimulationIntracellular BlockAntibodyIL-1aNEW!mouse PECmINFg (100ng/ml)(2h4)/LPS (100ng/ml)(22hr)2hr/22hr-MonensinALF-161IL-1bNEW!mouse PECmINFg (100ng/ml)(2h4)/LPS (100ng/ml)(22hr)2hr/22hr-MonensinB122IL-2mouse spleenConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d
Intracellular Cytokine Staining Protocol
(100ng/ml)(22hr) 2hr/22hr - Monensin B122 IL-2 mouse spleen ConA (3ug/ml) (2d)/IL-2 (20ng/ml)+IL-4 (20ng/ml) (3d) 2d/3d anti-CD3 (10ug/ml immobilized
。所有的细胞均培养在5% CO2,37°C的培养箱中,NK92和mNK细胞在含有2 mM L-谷氨酰胺,1.5g/L碳酸氢钠,0.2 mM肌醇,0.1 mM 2-巯基乙醇,0.02 mM叶酸,12.5%马血清,12.5% FBS,100-200 U/ml IL-2重组体的Alpha MEM培养基中培养。其它癌细胞培养在含有5% FBS,1%青霉素,1%螺旋霉素(GIBCO)的RPMI培养基中。NIH 3T3细胞培养在含有10%FBS,1%青霉素,和1%螺旋霉素的DMEM培养基中。 细胞溶解分析
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